ГОСТ 10444.9-88 С. 3
К 100см*основы, расплавленной и охлажденной до 45—55 *С, добавляют непосредственно перед
употреблением I см3раствора массовой концентрацией циклосерина 40 г/дм5.
Допускается при отсутствии трнптозы заменять ее равным количеством ферментативного
пептона.
3.2.2. Агар сульфит-полимиксин-неомиииновый; основу питательной среды готовят следую
щим образом: 17.0 г ферментативного пептона. 15 см* дрожжевого экстракта, 5.0 г хлорида натрия.
1.0 г безводного тиосульфата натрия, 1.0 г цитрата аммонийного железа. 12.0-15,0 г агара добавля
ют к 1дм3дистиллированной воды. Смесь, периодически перемешивая, подогревают до кипения
и кипятят до полного растворения всех составных частей. Устанааливают pH таким образом,
чтобы после стерилизации он соответствовал при температуре (25±!) ’С 7,6+0.1.
Стерилизуют при температуре (121±!) "С в течение 20 мин. Основу среды хранят при
температуре (4±2) "С не более 14 сут.
К 1дм3основы, расплавленной и охлажденной до 45- 55 "С, непосредственно перед употребле
нием добаатяют I см5 раствора массовой концентрации неомицина сульфата 50 г/дм3 или 5 см5
раствора массовой концентрации неомицина сульфата 10 г/дм3 (50 мкг/ см’ основы среды) и 8
см3 раствора массовой концентрации полимиксика 2,5 г/дм’ или 4 см’ раствора массовой
концентрацией полимнксина 5 г/дм3(20 мкг/см’ основы среды).
3.2.3. Среду Вильсон Блера, измененную для анаэробов, готовят по ГОСТ UW44.1.
3.2.4. Среду для анаэробов готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.5. Желатин-лактозная среда: 15,0 г триптозы или ферментативного пептона, 50 см5дрожжево
го экстракта. 120.0 г желатина, 5,0 г двузамещенного фосфорнокислого натрия растворяют в 1дм’
кипящей дистиллированной воды. Добавляют 10,0 г лактозы и 5 см’ 1 %-ного раствора индикатора
фенолового красного. Устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он
соответствовал при температуре (25±1) ‘С 7,4±0,1. Разливают в пробирки по 10 см ’ и стерилизуют
при температуре (121±1) *С в течение 15 мин. Хранят при температуре (4+2) "С не более 21 сут.
Перед употреблением среду кипятят в течение 10 мин на водяной бане.
3.2.6. Среда для изучения редукции нитратов и подвижности бактерий: 5,0 г галактозы. 5,0 г
глицерина, 1,0 г нитрата калия (не содержащего нитрит), 2,5 г двузамещенного фосфорнокислого
натрия (безводного), 3.0 гагара расгворяют в 1дм’ кипящего мясо-пептонногобульона. Устанавливают
pH раствора таким образом, чтобы после стерилизации он соответствоват при температуре (25±1) "С
7,3±0,1. Разливают в пробирки по 10см3и стерилизуют при температуре (121± 1) "С в течение 20 мни. В
готовой питательной среде контролируют по ГОСТ 10444.8 отсутствие нитритов.
Хранят при температуре (4±2) *С не более 28 сут. Перед употреблением среду кипятят в течение
10 мин в кипящей водяной бане и быстро охлаждают до комнатной температуры. Среда должна иметь
студнеобразную консистенцию.
3.2.7. Среду Роберта готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.8. Молоко лакмусовое готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.9. Сахарный кровяной агар по Цейсслеру с антибиотиками: к 100 см3сахарного кровяного
агара по Цейсслеру, приготовленного по ГОСТ 10444.1, перед розливом по чашкам Петри добавляют
1см3раствора массовой концентрации ииклосерина 40 г/дм5или 0.5 см’ раствора массовой концентра цией
неомицина сульфата 10 г/дм3.
Хранят при температуре (4+2) "С не более 3 сут.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
4.1. Выявление характерных колоний.
4.1.1. Для проведения испытания отбирают объем (1±0.1) см’ подготовленной пробы продукта,
его разведения или разведения культуральной жидкости.
Допускается для получения раздельных колоний проводить посев культуральной жидкости пет
лей (штрихом) на поверхность питательной среды.
4.1.2. Подготовитеиную пробу продукта, его разведения или разведения культуральной жидкости
высевают глубинным методом по ГОСТ 26670 параллельно в две чашки Петри. Посевы залипают
триптозо-сульфит-никлосернновьш или сульфит-полимиксин-неомициноным агаром, или сахарным
кроняньш агаром по Цейсслеру, или агаром Вильсон-Блера. Содержимое чашек Петри быстро, осто
рожными круговыми движениями перемешивают. После застывания среды чашки подсушивают и
заливают той же средой так. чтобы высота второго слоя питательной среды была не менее 4 мм.
277