ГОСТ Р 51440-99
суспензию 15 г силикагеля (3.3) о 40 см5толуола. После оседания силикагеля в колонку вносят 15 г
безводного сульфата натрия и дают растворителю стечь до верхней кромки насыпного слоя. В ко
лонку вносят экстракт из исследуемой пробы, посте чего растворителюдаютстечь до верхней кромки
насыпного слоя, элюат отбрасывают. В колонку вносят 200 см* элюирующего раствора (3.4) и
проводят элюирование при скорости потока около 5 см’/мнн, элюат собирают в градуированный
цилиндр. Собранный элюат упаривают приблизительно до объема 2 см’.
Сконцентрированный элюат количественно переносят в пробирку вместимостью 20 см1 с
помощью четырех порций этилацетата объемом около 4 см* каждая и упаривают досуха в токе азота.
Остаток немедленно растворяют в 0.5 см3этилацетата, так как патулнн не стабилен.
6.3 Тонкослойная хроматография
Пластинки для ТСХ. предварительно покрытые силикагелем (4.4), активируют притемпературе
110 "С в течение 2 ч. С помощью капиллярной пипетки или микрошприца на пластинку в точку,
находящуюся на расстоянии 2 см от левого края и 2 см от нижнего края, наносят апиквотную
часть очищенного экстракта из пробы (6.2) объемом 0.020 см3. В точку, находящуюся на
расстоянии 2 см от правого края и 2 см от нижнего края пластинки, наносят 0.005
см3стандартного раствора пагулнна (3.5). В точку, находящуюся на расстоянии 2 см от левого
края и 2 см от верхнего края пластинки, наносят также 0.005 см3 стандартного раствора
патулина. В точку, находящуюся на расстоянии 2 см отлевого края пластинки и 4 см от верхнего
края пластинки, наносят0.010 см3 стандартного раствора патулина (см. рисунок 1).
НаправлениеU-------------►
Размеры в сантиметрах
Рисунок I —Двумерная тонкослойная хроматография
Хроматограмму развивают в направлении / (рисунок 1), используя подвижную фазубензол/ме-
танол/уксусная кислота (3.2), до прохождения фронтом растворителя расстояния 14 см. Пластинку
вынимают из камеры, высушивают на воздухе, после чего развивают хроматограмму в направлении //
(рисунок 1), используя подвижную фазу толуол/этилаиетат/муравьиная кислота (3.2). до прохож дения
фронтом растворителя расстояния 14 см. Пластинку вынимают из камеры и высушивают при
комнатной температуре. Пластинку опрыскивают раствором гидрохлорида МБТГ (3.6), после чего
высушивают в течение 15 мин в сушильном шкафу (4.5) при температуре 130 *С.
6.4 Определение количества патулина в экстракте
Количество патулина в экстракте определяют сравнением интенсивности флюоресценции
пятна патулина из экстракта с пятнами патулина из стандартного раствора при облучении пластинки
длинноволновым ультрафиолетовым светом. Пятно патулина из экстракта ищут на пересечении
перпендикулярных линий, соединяющих пятна патулина из стандартного раствора. Если интенсив
ность флюоресценции пятна патулина из 0,020 см5экстракта выше интенсивности флюоресценции
пятен патулина из стандартного раствора, экстракт разводят этилацетатом и повторяют процедуру
3