5
кам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.
- Термины и определения
В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
- содержание витамина А: Содержание всех изомеров ретинола, определенное в соответствии с настоящим стандартом и выраженное в международных единицах на килограмм (МЕ/кг).
Примечание — 1 МЕ витамина А соответствует 0,300 мкг изомеров ретинола.
- Сущность метода
Сущность метода заключается в омылении анализируемой пробы водно-спиртовым раствором гидроокиси калия, экстракции витамина А петролейным эфиром, выпаривании петролейного эфира и растворении полученного остатка в 2-пропаноле. Содержание витамина А в 2-пропаноловом экстракте определяют с помощью ВЭЖХ обратными фазами, используя условия, в которых получается один пик для всех изомеров ретинола.
- Реактивы
- Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
- Калия гидроокись (КОН) по ГОСТ 24363, раствор с массовой долей 50 %
500 г гидроокиси калия помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см3 (см. 6.17), растворяют в дистиллированной воде (см. 5.1) и доводят объем раствора водой до метки.
- Спирт этиловый ректификованный (С2Н5ОН) по ГОСТ Р 51652 с объемной долей 95 % или эквивалентный технический метилированный спирт.
- 2-пропанол (С3Н7ОН).
- Эфир петролейный, интервал температуры кипения от 40 °С до 60 °С. Остаток после выпаривания должен быть не более 20 мг/дм3.
- Стандартный образец витамина А (ретинил-ацетата)
- Ретинил-ацетат, ацетат витамина А (С22Н32О2) молярной массой 328,5 г/моль, чистота не менее 90 %.
- Ретинол, витамин А спирт (С20Н30О) молярной массой 286,5 г/моль, чистота не менее 90 %.
- Спирт метиловый (СН3ОН) специальной марки для ВЭЖХ.
- Подвижная фаза для жидкостной хроматографии
Смешивают метиловый спирт (см. 5.7) и дистиллированную воду (см. 5.1) в соотношении 770:30 по объему и при необходимости фильтруют через мембранный фильтр (см. 6.6).
- Натрий сернокислый (№2S04) по ГОСТ 4166, безводный.
- Натрия аскорбат, раствор массовой концентрации с =100 г/дм3.
- Инертный газ, например, азот по ГОСТ 9293.
Примечание — Все реактивы должны быть квалификации х. ч. или ч. д. а.
- Средства измерений, оборудование и материалы
Используют обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее:
Высокоэффективный жидкостный хроматограф, состоящий из следующего оборудования: