8
- трированной серной кислоты и 10 см3 30 %-ного раствора перекиси водорода. Колбу прикрывают насадкой или стеклянной воронкой, кварцевую пробирку прикрывают специальным каплеуловителем и приступают к нагреванию в наклонном положении под углом 45° при температуре от 450 °С до 500 °C.
Необходимо следить, чтобы жидкость в колбе непрерывно кипела и на стенках колбы не оставалось черных несгоревших частиц, смывая их легкими круговыми движениями.
При наличии черных частиц на горловине колбы, если они не захватываются конденсатом паров кислоты в период кипения или кислотой при перемешивании содержимого колбы, следует хорошо охладить колбу, смыть эти частицы в колбу небольшим количеством воды, затем продолжить сжигание.
После того как жидкость в колбе обесцветится (допускается слегка зеленоватый оттенок), нагрев продолжаютещев течение 30 мин. Дают колбе остытьдо температуры (20 + 5) °С, к содержимому приливают, обмывая стенки колбы, от 20 до 30 см3 дистиллированной воды и приступают к отгонке аммиака.
- После подготовки прибора для отгонки по 7.7 открывают краны 3 и 6 и закрывают зажим 4 (см. рисунок приложения А). Под холодильник вместо пустой колбы подставляют колбу с 25 см3 борной кислоты массовой концентрации 40 г/дм3 и пятью каплями смешанного индикатора так, чтобы кончик холодильника был погружен в раствор. Вместо пустой колбы Кьельдаля присоединяют колбу с минерализованной пробой.
Закрывают кран 6, наливают в воронку 60 см3 раствора гидроокиси натрия и, открывая понемногу кран 6 при осторожном покачивании колбы Кьельдаля, вливают гидроокись натрия. Открывая зажим 4, закрывают краны 3 и 6. В холодильнике пары раствора аммиака конденсируются и попадают в колбу с раствором борной кислоты. Перегонку продолжают 10 мин, считая с того момента, когда борная кислота в приемной колбе приобретет зеленое окрашивание. После окончания отгонки конец трубки холодильника вынимают из борной кислоты, ополаскивают дистиллированной водой и продолжают процесс перегонки еще 2 мин. Затем открывают краны 3 и 6, закрывают зажим 4.
Прииспользованииавтоматическихприборовдля перегонки процесспроводят согласно прилагаемой инструкции по применению.
- Содержимое приемной колбы титруют водным раствором соляной кислоты молярной концентрации с (НС1) = 0,1 моль/дм3 до перехода окраски индикатора от зеленой к фиолетовой.
- Пробу анализируют два раза в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ РИСО 5725-1 (подраздел 3.14).
- Для внесения соответствующей поправки на реактивы в результат измерения проводят определение массовой доли азота в контрольной пробе, используя вместо анализируемого продукта 2 см3 дистиллированной воды и (0,100 + 0,001) г сахарозы. Определение массовой доли азота в контрольной пробе проводят по трем параллельным определениям. За окончательный результат определения поправки на реактивы принимают среднеарифметическое значение результатов трех параллельных определений.
Контрольную пробу проводят при замене хотя бы одного из реактивов.
- Обработка результатов измерений
- Массовую долю сывороточных белков X, %, в анализируемой пробе продукта вычисляют по формуле
X = (V-Ц)п ■ 14,0067 ■ 6,28 ■ 0,95100 m ■ 1000
где V — объем раствора соляной кислоты, израсходованной на титрование анализируемого раствора, см3;
V1 — объем раствора соляной кислоты, израсходованной на титрование в контрольном опыте, см3; n — фактическая молярная концентрация соляной кислоты, моль/дм3, в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1;
14,0067 — масса азота, эквивалентная 1дм3 раствора соляной кислоты с молярной концентрацией с (НС!) = 0,1 моль/дм3, г;
6,28 — коэффициент пересчета массовой доли азотистых веществ в анализируемой пробе на массовую долю сывороточного белка;
0,95 — поправочный коэффициент, учитывающий массовую долю небелкового азота; m — масса анализируемой пробы по 9.2, г;
1000 — коэффициент пересчета см3 вдм3.