7
чего многократно ополаскивают сначала водопроводной, а затем несколько раз дистиллированной водой. Окончательно посуду трижды ополаскивают бидистиллированной водой.
- Приготовление растворов
- Приготовление элюента (раствора ортофосфорной кислоты молярной концентрацией 2,2 ммоль/дм3)
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 наливают приблизительно 700 см3 бидистиллированной воды, добавляют пипеточным дозатором 0,15 мм3 концентрированной ортофосфорной кислоты и
- см3 96 %-ного этилового спирта, полученный раствор доводят до метки бидистиллированной водой. Тщательно перемешивают.
Срок хранения в вытяжном шкафу в колбе с притертой пробкой — 1 мес.
- Приготовление гидроокиси натрия концентрацией 0,1 моль/дм3
Навеску гидроокиси натрия массой 1,0 г растворяют не содержащей углекислого газа дистиллированной водой и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3. Объем раствора доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
Срокхранения раствора в холодильнике — 1 мес.
- Приготовление растворов кверцетина
- Приготовление исходного раствора кверцетина концентрацией 100 мг/дм3
В стаканчике для взвешивания отвешивают (20,0 + 0,1) мг кверцетина, добавляют 6,0 см3 раствора гидроокиси натрия молярной концентрацией 0,1 моль/дм3 по 6.3.2. Перемешивают до полного растворения. После растворения кверцетина содержимое стаканчика количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 см3 и объем раствора доводят до метки дистиллированной водой.
Срокхранения раствора в холодильнике — 1 мес.
- Приготовление градуировочных растворов кверцетина концентрацией 0,2; 0,5; 1,0 и
- мг/дм3
В мерные колбы вместимостью 10 см3 пипеточным дозатором вводят соответственно 0,02, 0,05, 0,1 и 0,4 см3 раствора кверцетина по 6.3.3.1, доводят до метки элюентом.
Градуировочные растворы кверцетина готовят каждый раз при построении градуировочныххарак- теристик.
6.4 Подготовка проб
- Из жидких проб, отобранных по 6.1, готовят две параллельные пробы по 10 см3 продукта.
- Из подготовленных по 6.4.1 проб отбирают по 1 см3 и доводят элюентом до 10 см3.
- Подготовленную по 6.4.2 пробу фильтруют через бумажный фильтр.
- Твердую пробу, отобранную по 6.1, измельчают и гомогенизируют.
В химический стакан вместимостью 150 см3 вносят навеску гомогената массой 1,0 г, доводят элюентом до 100 см3 и тщательно перемешивают.
- Раствор переносят в конические центрифужные пробирки и центрифугируют со скоростью 3000 об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость сливают, делят на две параллельные пробы и используют для анализа.
При массовой концентрации антиоксидантов в пробе, превышающей диапазон измерений (4 мг/дм3), пробу кратно разбавляют элюентом.
- Подготовка прибора к работе
Установку, включение и подготовку анализатора и регистрирующего устройства осуществляют в соответствии с руководством по эксплуатации.
Устанавливают рабочий потенциал, равный плюс 1,3 В.
Скорость подачи элюента устанавливают в соответствии с рекомендациями изготовителя прибора.
- Градуировка прибора
- Градуировочные растворы кверцетина (см. 6.3.3.2) последовательно, начиная с градуировочного раствора минимальной концентрации, вводят в прибор. Для этого шприц вместимостью 1 см3 промывают не менее трех раз, полностью заполняя его бидистиллированной водой, а затем однократно соответствующим градуировочным раствором. Заполняют шприц градуировочным раствором и промывают дозировочную петлю этим раствором не менее трех раз.
- По окончании операции по 6.6.1 дозируют градуировочный раствор в поток элюента и, используя программное обеспечение, регистрируют выходной сигнал анализатора (площадь выходной кривой).
Каждый градуировочный раствор вводят пять раз и, используя программное обеспечение к анализатору, вычисляют среднеарифметическое значение выходного сигнала анализатора и относительное среднеквадратическое отклонение. Если относительное среднеквадратическое отклонение не превышает 5 %, то за значение выходного сигнала анализатора, соответствующее данному градуировочному раствору, принимают среднеарифметическое значение. В случае обнаружения отклонения