С. 3 ГОСТ 28396-89
3.3. П р и г о т о в л е н и ер а с т в о р и т е л е йдлят о н к о с л о й н о йхроматогра-
ф и и
Для проведения анализа готовят системы растворителей следующего состава:
I. Толуол —уксусноэтиловый эфир-муравьиная кислота в объемных соотношениях 50:40:10.
И. Хлороформ-ацетон в объемных соотношениях 90:10.
III. Хлороформ-гексан-ацетон в объемных соотношениях 71:16:13.
IV. Бензол-метанол-уксусноэтиловый эфир в объемных соотношениях 96:4:1.
V. Эфир диэтиловый.
3.4. Подгот овка х р о м а т о г р а ф и ч е с к о й камеры
В хроматографическую камеру вносят систему растворителя по п. 3.3. Толщина слоя прибли
зительно 8 мм. Заднюю стенку хроматографической камеры облицовывают фильтровальной бума
гой, пропитанной растворителем.
3.5. Пр и г о т о в л е н и е камеры для х л орирова ни я
Вхроматографическую камеру вносят 25 см3соляной кислоты и 25 см5раствора перманганата
калия и смешивают.
При этом крышка должна быть закрытой. Кроме того, в камеру ставят стеклянный предмет
(например чашку Петри) для того, чтобы имелась повышенная площадка, на которую можно
помещать ТСХ-пластинку, не погружая ее в жидкость. Камеру готовят непосредственно перед
проведением испытания.
3.6. Пр и г о т о в л е н и е с т а н д а р т н о г о раствора патулина
Рабочий стандартный раствор патулина готовят из основного раствора. Основной раствор,
содержащий 10 мкг/см3патулина, готовят следующим образом: 1,0 мг патулина растворяют хлоро
формом и доводят объем до 100.0 см3.
Концентрацию патулина в основном растворе контролируют при помощи спектрофотометра.
Дая этого 5,0 см* основного раствора выпаривают досуха в вакуумном испарителе под азотом при
30—35 *С, сразу растворяют остаток в 5.0 см’ этанола и измеряют поглощение основного раствора и
этанола с толщиной поглощающего свет слоя 0,5 см при длине волны 275 нм.
Концентрацию патулина (О, мкг/см3, вычисляют по формуле
A M
1000
*
t-D
где А — поглощение раствора патулина на длине волны 275 нм;
А/— молярная масса патулина, г/моль, равная 154;
К — калибровочный коэффициент спектрофотометра: от 0,95 до 1.05;
£ — молярный коэффициент поглощения патулина при дзине волны 275 нм, равный 14600;
D — длина оптического нуги, см.
Стандартный раствор, содержащий 2 мкг/см’ патулина. готовят следующим образом: 20,0 см*
основного раствора разбавляют хюроформом до 100.0 см3.
Основной и стандартный растворы патулина хранят в темной посуде при 4 *С.
3.7. Подгот овка проб
Исследуемый образец корма измельчают, тщательно перемешивают и пропускают через
сито.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ
4.1. Получение э к страк та
10,0 г подготовленной пробы переносят в колбу Эрленмейера вместимостью 250 см-, добав
ляют 80 см3 хлороформа и 10 см3 метанола, закрывают колбу и встряхивают при комнатной
температуре в аппарате для встряхивания в течение 1 ч. Полученный экстракт фильтруют через
воронку Бюхнера, остазок трижды промывают порциями по 25 см3 хлороформа. Объединенные
хлороформные экстракты смешивают с безводным сульфатом натрия в количестве около 15 г и
оставляют в закрытой колбе на I ч, периодически встряхивая. Затем сульфат натрия отделяют через
складчатый фильтр и, во избежание потерь экстракта, сульфат натрия промываютдважды порциями по
10 см3хлороформа. Затем в круглодонной колбе в вакуумном испарителе экстракт выпаривают досуха
при 40 "С.