С. 3 ГОСТ 25102-90
тиллированной воды. pH (7,6±0,2) восстановленного обезжиренного молока, подогретого до темпера
туры (45± 1) *С, устанавливают раствором с массовой долей гидроокиси натрия 20%. К подготовлен
ному молоку добавляют от 0.5до 1.0 г панкреатина, предварительно разведенного в 20—30см’ дистил
лированной воды температурой (45±1) *С. Через 3—5 мин к молоку с панкреатином добавляют 5 см‘
хлороформа.Колбу закрывают корковой пробкой и выдерживают в термостате при температуре
(40±1) *Свтечение 18—24ч. В течение первых 3 ч молоко несколько раз перемешивают (пробку после
встряхивания приоткрывают для удаления паровхлороформа). Через указанное время колбу вынимают из
термостата, гндролн зова иное молоко фильтруют через бумажный фильтр, разводят питьевой во дой,
добавляя к I части гидролнзованного молока 2 части воды, устанавливают pH (7.1±0.1) и
стерилизуют при температуре (121±2) “С в течение (20+5) мин.
2.2.2.4. П р и г о т о в л е н и еп и т а т е л ь н о йс р е д ыд л яо п р е д е л е н и я
о б щ е г ок о л и ч е с т в ас п о рм е з о ф и л ь и ы х а н а э р о б н ы хб а к т е р и й
К I дм’ дистиллированной воды добавляют (40.0±0,5) г моднфииированной агаровой среды для
определения споровых анаэробных бактерий. Смесь перемешивают, нагревают до полного растворения
агара (при наличии осадка фильтруют через ватно-марлевый фильтр), устанааливают pH (7.1±0.1).
Разливают в пробирки по (10±2) см1, такрыпают ватными или ватно-марлевыми пробками и стерили зуют
при температуре (121±2) *С в течение (20±5) мин.
Допускается приготовление среды для определения общего количества спор мезофильных анаэ
робных бактерий из отдельных ингредиентов. Для этого в 1дм* гидролизованного молока, приготов
ленного по п. 2.2.2.3. вносят 15г микробиологического агара, 0.5 гсолянокислого цистеина или 1,0 г
аскорбиновой кислоты, 1,0 грастворимого крахмала и 5,0 г уксуснокислого натрия. Расттюряютдобав
ленные компоненты, нагревая смесь в текучем пару. Добавляют 5,0 г глюкозы и 20 см’ дрожжевого
автолизата, приготовленного по п. 2.2.2.2, иди 4.0 гсухого дрожжевого автолизата. Устанавливают pH
(7,1±0.1), разливают среду в пробирки по (10±2) см’, закрывают ватными или ватно-марлевыми
пробками и стерилизуют при температуре (115±2) *С втечение (20±5) мин.
При длительном хранении среды (более 20 сут) после охлаждения пробирок со средой ватные
пробки в стерильных условиях заменяют на стерильные резиновые.
Приготовленную среду хранят втемном месте при температуре (8±2) *Сне более 3 мес.
2.2.2.5. П р и г о т о в л е н и ев о д н о г оа г а р а
В 1дм1питьевой воды вносят 15 г мелко измельченного агара и нагревают до кипения. После
расплавления агара растпор в горячем состоянии фильтруют через ватный фильтр, разливают в про
бирки по 15 см* или в колбы по 50—100 см’, закрывают ватными пробками и стерилизуют при
температуре (121±2) *С втечение (20±5) мин.
2.2.3. Подготовка образцовмолока и сыра к анализу
2.2.3.1. Образцы молока по 15 см’ переносят пипеткой встерильные пробирки, которые закрыва
ют ватными пробками. При этом необходимо следить, чтобы капельки молока не оставались на стенках
пробирок.
11одготовленные пробирки с исследуемыми образцами молока вместе с контрольной пробиркой,
в которой находятся 10см1молока и термометр, помещают в водяную баню (уровень воды в водяной
бане должен быть выше уровня молока на 10—15 мм) и выдерживают при температуре (75±1) *С
в течение (30±3) мин. затем быстро охлаждают до комнатной температуры, погружая их в
холодную воду.
В зависимости от обсемененноет исследуемого молока спорами мезофильных анаэробныхбакте
рий из прогретых проб готовят десятикратные разведения в растворе хлористого натрия, приготовлен
ном по п. 2.2.2.1, по ГОСТ 9225.
2.2.3.2. Подготовка проб сыра к анализу и приготовление разведений продукта для посева —по
ГОСТ 9225.
Подготовленные пробирки с разведениями проб сыра вместе с контрольной пробиркой, в кото
рой находятся термометр и 10см1раствора хлористого натрия, приготовленного по п. 2.2.2.1, помеша
ют в водяную баню и выдерживают по режимам, указанным в п. 2.2.3.1.
2.3. П р о в е д е н и е а н а л и з а
Для определения количества спор мезофильныханаэробных бактерий в молоке и сырах проводят
посев 1см’ исследуемого образца (для молока — нулевое, первое и второе, а для сыра - первое и
второе разведения) в пробирку с (10±2) см’ питьевой среды, приготовленной по п. 2.2.2.4. выдержан
ной перед анализом в кипящей водяной бане в течение 30 мин и охлажденной до температуры
(40±1) *С.