ГОСТ 2W8!—91 С. 5
ток в объеме 0,025 см3 в плексигласовых панелях с лунками с
0,7 %-иой суспензией эритроцитов.
2.2.3. Обработка результатов
Наличие на дне и стенках лунок осадка эритроцитов в виде
опрокинутого «зоктика> свидетельствует о положительной РГА.
При отрицательной реакции в опыте и контроле эритроциты обра
зуют на дне лунки диск с ровными краями.
Титром вируса считают предельное разведение его. при кото ром
наблюдается полная агглютинация эритроцитов, что соответ
ствует одной агглютинирующей единице (I АЕ).
2.3. Метод идентификации вируса
Сущность метода заключается в способности специфических
антител нейтрализовать гсмагглютннируюшую активность вируса
в реакции торможения гемагглютннации со специфическими грип
позными сыворотками.
2.3.1. Аппаратура, материалы и реактивы
2.3.1.1. А п п а р а т у р а ,м а т е р и а л ыиреакт ивы —
по п. 2.2. I и д о п о л н и т е л ь н о :
набор сухих инактивированных антигенов вируса гриппа три
надцати серологических вариантов и гипериммунных сывороток
для диагностики гриппа птиц;
аппарат Киппа;
баня водяная;
мел или мрамор;
кислота соляная по ГОСТ 3118 с массовой долей 30%.
2.3.2. Проведение исследования
После определения титра исследуемого вируса в количествен
ной РГА по п. 2.2.1 ставят РТГА. Вначале устанавливают рабочую
дозу вируса (4 АЕ), для чего вирус разводят физиологическим
раствором во столько раз, сколько получится от деления на 4 об
ратного значения гемагглютннирующего титра вируса. Например:
если титр вируса 1 :256, то рабочее разведение будет 256 :4 =
“ 64, т. е. в 0.2 см3 разведенного 1:64 вируса будет содержаться 4
ЛЕ. Для его приготовления в данном примере берут 63 см3
физиологического раствора н 1см3исходного вируса.
Перед постановкой основного опыта проверяют правильность
выбора 4 АЕ. Для этого на панели в четыре лунки наливают по
0.2 см3 физиологического раствора, затем в первую лунку добав
ляют 0,2 см3 4 АЕ вируса н после пипетнрования 0,2 см9 переносят
во вторую лунку, затем в третью и т. д. Из четвертой лунки 0,2 см3
разведенного вируса удаляют в дезинфицирующий раствор, Та
ким образом, в первой лунке должно быть 2 АЕ, во второй — 1
АЕ, в третьей0.5 АЕ, в четвертой — 0,25 ЛЕ. После этого в
каждую лунку добавляют по 0,2 см* 1 %-ной суспензии
эритроцитов. Па нель встряхивают и оставляют на 30 мин при
комнатной темпе ратуре. При правильном определении рабочей
дозы (4 ЛЕ) в пер-