■С 10 ГОСТ
Антигены для диагностики бруцеллеза стандартизуют по меж
дународной сыворотке анти-Brucella aborlus, антиген овисный—по
полиглобулину.
2.2.2. Подготовка к исследованию
2.2.2.1. Для приготовления карбонизированного физиологичес
кого раствора для постановки РА в 1000 см5дистиллированной во
ды растворяют 8,5 г хлористого натрия и 5 г карболовой кислоты.
Раствор доводят до кипения, охлаждают, фильтруют через бу
мажный фильтр.
2.2.2.2. Для приготовления карбонизированного 5%-ного раст
вора хлористого натрия для постановки РА в 1000 см» дистилли
рованной воды растворяют 50 г хлористого натрия и 5 г карболо
вой кислоты. Раствор доводят до кипения, охлаждают, фильтруют
через бумажный фильтр.
2.2.2.3. Для приготовления разбавителя для постановки РСК и
РДСК вначале готовит основные растворы солей магния и каль
ция следующим образом: 1 г хлористого магния растворяют в
И,8 см3 и 1 г хлористого кальцияв 54,4 см» дистиллированной
воды Основные растворы этих солей хранят н холодильнике.
Для изготовления 1 дм3 разбавителя берут: 8,5 г хлористого нат
рия, 1,2 см» хлористого магния (основного раствора), 1,2 см3 хло
ристого кальция (основного раствора) и растворяют в 1 дм3 дис-
тиллкрованой воды. Смесь кипятят, охлаждают, фильтруют через
бумажный фильтр и доводят pH до 7,3—7,4 прибавлением раст
вора гидроокиси натрия или соляной кислоты.
2.2.2.4. Для приготовления раствора Алсивера для консервиро
вания эритроцитов в 1000 см» дистиллированной воды растворяют
18,7 г глюкозы, 4,2 г хлористого натрия. 8,0 г лимоннокислого нат
рия, 0,5 г лимонной кислоты. Раствор доводят до кипения, охлаж
дают. фильтруют через бумажный фильтр, разливают в колбы
или флаконы и стерилизуют в автоклаве при температуре 102—
105°С в течение 30 мин или фильтруют через стерилизующие плас
тины фильтра Зейтца.
2.2.2.5. Для приготовления эритроцитов барана для постанов
ки РСК н РДСК кровь берут из яремной вены барана (овцы) с
соблюдением правил асептики в сосуд, содержащий стеклянные
или фарфоровые бусы (для дефибрннирования), или сосуд, со
держащий раствор Алсивера в количестве, равном объему взятой
крови (для консервирования).
Для приготовления эритроцитов используют свежедефибрини-
рованную кровь барана или через 6—14 сут после ее консервиро-
вания в растворе Алсивера и 2—4 раза (по 15 мин) отмывают на
центрифуге при 2000—2500 мин-1 в разбавителе до полного обес
цвечивания надосадочной жидкости. Для постановки РСК исполь
зуют 2—5%-ную, а для РДСК — 3—4%-ную взвесь эритроцитов
(от осадка) в разбавителе.