ГОСТ Р 54949—2012
Путем приложения через отводную трубку (см. 5.4.2) небольшого давления с помощью инертно-
го газа (см. 4.10) переносят верхний слой петролейного эфира в делительную воронку вместимостью
1000 см
3
(см. 5.13).
8.3.2 В цилиндр добавляют 125 см
3
петролейного эфира, закрывают пробкой и энергично встря-
хивают в течение 1 мин. Дают слоям разделиться и переносят верхний слой в ту же делительную во-
ронку (см. 5.13) с помощью регулируемой сифонной трубки как описано в 8.3.1.
8.3.3 Повторяют этап экстракции витамина Е по 8.3.2.
8.3.4 Объединенные экстракты петролейного эфира промывают четырьмя порциями по 100 см
3
дистиллированной воды, сначала немного наклоняя делительную воронку из стороны в сторону,
потом слегка встряхивая, чтобы свести к минимуму образование эмульсии.
8.3.5 Промытый экстракт через воронку для фильтрования (см. 5.14), заправленную фильтро-
вальной бумагой средней/быстрой фильтрации (см. 5.15) со слоем 30 г безводного сернокислого на-
трия (см. 4.8), переносят в круглодонную колбу для вакуумного выпаривания по ГОСТ 15336 (см. 5.16).
Делительную воронку споласкивают двумя порциями по 20 см
3
петролейного эфира и добавляют
их через фильтр в колбу для выпаривания.
Промывают фильтр еще двумя порциями по 25 см
3
петролейного эфира и собирают смывы в кол-
бу для выпаривания.
8.3.6 Петролейный эфир выпаривают из экстракта досуха на роторном испарителе (см. 5.4) под
вакуумом при температуре не выше 40 °C.
Необходимо следить за тем, чтобы колбу извлекли из роторного испарителя немедленно после
достижения точки высыхания, так как продолжительное высушивание может привести к потере вита-
мина Е.
Если концентрация витамина Е в экстракте петролейного эфира достаточно высока, экстракт
можно довести до фиксированного объема петролейным эфиром и аликвотную часть взять для выпа-
ривания. Атмосферное давление восстанавливают с помощью инертного газа (см. 4.10).
П р и м еч а н и е — Нумерация пунктов введена с целью использования ссылок на повторяющиеся этапы
испытаний.
8.4 Определение
5
8.4.1 Остаток (см. 8.3.6) растворяют в минимальном объеме гексана (см. 4.4) и переносят количе-
ственно в мерную колбу вместимостью 25 см
3
(см. 5.17).
Колбу для выпаривания споласкивают тремя небольшими порциями гексана, перенося смывы в
ту же мерную колбу. Доводят объем содержимого колбы до метки гексаном и перемешивают.
При необходимости экстракт пробы фильтруют через мембранный фильтр (см. 5.5) или центри-
фугируют.
8.4.2 Вводят 20 мм
3
экстракта пробы в колонку жидкостного хроматографа (см. 5.1) и измеряют
площадь пика DL-
α
-токоферола.
Предлагаются следующие условия ВЭЖХ:
- колонка для жидкостной хроматографии (см. 5.1.3) размером 250 × 4,6 мм, набивка — кремне-
зем с размером частиц от 5 до 10 мкм или равноценная;
- подвижнаяфаза(см.4.11):смесьгексана(см.4.4)и1,4-диоксана(см.4.7)всоотношении970:30
по объему;
- скорость потока: 1,5 см
3
/мин;
- детектор флуоресценции (см. 5.1.4) (возбуждение при длине волны 295 нм, испускание при дли-
не волны 330 нм).
Допускается использовать другие условия, если они дают равноценный результат.
Также можно использовать хроматографию обратными фазами при условии, что эффективность
колонки достаточна, чтобы отделить DL-
α
-токоферол от других токоферолов и совместно экстрагируе-
мых с витамином Е веществ из пробы. Если используют хроматографию обратными фазами, растворы
пробы и стандартного образца необходимо разбавить подходящим растворителем, например, метило-
вым спиртом (см. 4.13).
8.4.3 Рассчитывают среднюю площадь пика по повторным вводам экстракта пробы и определяют
концентрацию DL-
α
-токоферола в экстракте:
а) либо по ссылке на среднюю площадь пика, полученного при повторных вводах раствора стан-
дартного образца DL-
α
-токоферола массовой концентрации в пределах 5 % от концентрации в экстрак-те
пробы,
б) либо по ссылке на градуировочную кривую, построенную по 8.5.