ГОСТ Р 54949—2012
верждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана
датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение
рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то поло-
жение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Сущность метода
Сущность метода заключается в омылении анализируемой пробы водно-спиртовым раствором
гидроокиси калия, экстракции витамина Е петролейным эфиром, выпаривании петролейного эфира и
растворении полученного остатка в гексане. Содержание витамина Е в гексановом экстракте определя-
ют с помощью ВЭЖХ нормальными фазами, используя условия разделения DL-α-токоферола и других
токоферолов, выраженное в международных единицах на килограмм (МЕ/кг).
4 Реактивы
4.1 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
4.2 Калия гидроокись (КОН) по ГОСТ 24363, раствор с массовой долей 50 %
2 5
24
500 г гидроокиси калия помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см
3
(см. 5.17), растворя-
ют в дистиллированной воде (см. 4.1) и доводят объем раствора дистиллированной водой до метки.
4.3 Спирт этиловый ректификованный (С Н ОН) по ГОСТ Р 51652 объемной долей 95 % или
эквивалентный технический метилированный спирт.
4.4 Гексан специальной марки для ВЭЖХ.
4.5 Эфир петролейный, интервал температур кипения от 40 °C до 60 °C, остаток после выпари-
вания должен быть не более 20 мг/дм
3
.
4.6 Стандартный образец витамина Е: DL-α-токоферол, чистотой не менее 96,0 %. Чистота стан-
дартного образца должна проверяться с помощью спектрофотометрического метода (см. 8.5.2).
4.7 1,4-диоксан специальной марки для ВЭЖХ.
4.8 Натрий сернокислый (Nа SO ) по ГОСТ 4166, безводный.
4.9 Натрия аскорбат, раствор с массовой концентрацией с = 100 г/дм
3
.
4.10 Инертный газ, например, азот по ГОСТ 9293.
4.11 Подвижная фаза для жидкостной хроматографии
2 5
Смешивают 1,4-диоксан (см. 4.7) и гексан (см. 4.4) в соотношении 30:970 по объему. Смешанный
раствор перед применением фильтруют через мембранный фильтр (см. 5.5).
4.12 Спирт этиловый ректификованный (С Н ОН) по ГОСТ Р 51652 с объемной долей 96 %.
4.13 Спирт метиловый (СН
3
ОН) специальной марки для ВЭЖХ.
П р и м еч а н и е — Все реактивы должны быть квалификации х. ч. или ч. д. а.
5 Средства измерений, оборудование и материалы
2
Используют обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее:
5.1 Хроматограф высокоэффективный жидкостный, состоящий из следующего оборудования:
5.1.1 Насос, установленный для подачи элюента с постоянной объемной скоростью 1,5 см
3
/мин.
5.1.2 Устройство для ввода ВЭЖХ.
5.1.3 Колонка длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, набивная, неподвижная фаза со-
стоит из кремнезема.
Колонка считается удовлетворительной, если число теоретических тарелок не менее 5000, значе-
ние коэффициента емкости k’ равно 0,8 в отношении DL-α-токоферола. Рекомендуемый размер частиц
от 5 до 10 мкм.
Допускается использовать другие системы при условии, что достигается удовлетворительное от-
деление витамина Е от других экстрагируемых с ним веществ.
5.1.4 Детектор, позволяющий производить измерение флуоресценции, испускаемой при длине
волны 326 нм, если элюент колонки облучают ультрафиолетовым (УФ) светом при длине волны 293 нм, с
интегратором (записывающим устройством).
5.2 Баня с кипящей водой.
5.3 Испаритель роторный вакуумный с водяной баней при температуре 40 °C.