ГОСТ Р 50454-92
8.3.5Жидкости хорошо перемешивают новой стерильной пипеткой. Операции повторяют до
тех пор, пока нс подучат разведение 10-6.
8.4 Предполагаемые колнформиые бактерии
8.4.1 Посев
Переносят новой стерильной пипеткой 6 порций по I см5 гомогената (разделяя их на две
трехкратные повторности) и в трехкратной повторности по 1 см5 каждого из пяти последующих
разведений (8.3.3—8.3.5) двух серий разведений в пробирки, содержащие по 10 см-’ селективного
бульона одинарной концентрации (5.2.16); начинают посев с наибольшего разведения гомогената и
постепенно переходят к наименьшему, предварительно перемешивая содержимое пробирок трех
кратным наполнением и выдуванием пипетки.
Если ожидается выявить очень маленькое количество колиформных бактерий, то таким же
образом переносят 6 порций по 10см3гомогената (две трехкратные повторности) в пробирки с 10см3
селективного бульона двойной концентрации (5.2.1а).
используя
стерильную пипетку вместимостью
К) см3.
8.4.2 Инкубирование
Пробирки, пригото&тенные по 8.4.1, выдерживают в термостате при температуре (30±1) ’С в
течение (48±2) ч.
8.4.3 Интерпретация результатов
После выдерживания в термостате пробирки с посевом просматривают и отмечают положи
тельные, то есть те, в которых наблюдается рост и образование таза, заполнившего не менее 1/10
объема трубки Дархема.
8.5 Предполагаемые Escherichia coli
8.5.1 Посев
Используя стерильную пипетку вместимостью 1 см3 для каждой пробирки, делают посев 1
капли культуры из положительных пробирок с предполагаемыми колиформными бактериями (8.4.3)
в пробирку с 10 см3бульона одинарной концентрации (5.2.16) и в пробирку с 10 см3триптоновой
воды, предварительно подогревая среды до 44 "С.
8.5.2 Инкубирование
Пробирки, приготовленные по п. 8.5.1, выдерживают на водяной бане при температуре
(44±0.1) *С в течение 48 ч.
8.5.3 Интерпретация результатов
8.5.3.1 Образование газа
Пробирки, содержащие бульон с посевом, после инкубирования в течение 48 ч просматривают.
Регистрируют как положительные те пробирки, в которых наблюдается рост и образование
газа, заполнившего не менее 1/10 объема трубки Дархема.
8.5.3.2 Образование индола
В пробирки, содержащие триптоновую воду с посевом, после инкубирования в течение 48 ч
добавляют 0.5 см3индольного реактива, хорошо встряхивают и исследуют по истечении 1 мин.
Красное окрашивание спиртового слоя указывает на присутствие индола.
Регистрируют как положительные те пробирки, в которых образовался индол.
9 Обработка результатов
9.1 Предполагаемые колнформиые бактерии
9.1.1 По количеству положительных пробирок с предполагаемыми колиформными бактериями
(8.4.3) для различных разведений рассчитывают наиболее вероятное число (НВЧ) этих микроорга
низмов на I г мяса или мясного продукта, как указано в 9.1.2—9.1.4.
9.1.2 Для расчета НВЧ выбирают три последовательных разведения в соответствии с одним из
следующих правил;
а) когда есть разведение, дающее три положительные пробирки, выбирают наибольшее разве
дение (наименьшей концентрации), дающее три положительные пробирки, и два последующих
разведения (концентрацией 1/10 и 1/100 выбранного разведения).
Если последующие разведения оказались недостаточными в сравнении с наибольшим, дающим
три положительные пробирки, выбирают три наибольших разведения серии;
б) когда нет разведения, дающего три положительные пробирки выбирают три наибольших
разведения серии;
83
4