ГОСТ Р ИСО 14851—2022
Перед использованием определяют содержание взвешенных веществ (например, по [4]). При
необходимости концентрируют ил путем осаждения таким образом, чтобы объем ила, добавляемого в
испытуемую пробу, был минимальным. Добавляют соответствующий объем для получения взвешенных
твердых веществ в диапазоне от 30 мг/дм3 до 1000 мг/дм3 в конечной смеси.
Если эндогенная респирация инокулята слишком высока (избыточна), следует перед использо
ванием стабилизировать инокулят путем аэрации. Приводят температуру испытания в соответствие с
используемым инокулятом.
Также полезно определение колониеобразующих единиц (cfu) используемого инокулята. Испыту
емая смесь предпочтительно должна содержать от 103 до 106 cfu/см3.
При моделировании процессов биоразложения в природных условиях или при определении ба
ланса углерода (см. приложение Е) рекомендуемая концентрация инокулята — 30 мг/дм3 взвешенных
веществ. Поскольку твердые вещества могут мешать определению углеродного баланса, рекоменду
ется использовать следующую процедуру приготовления инокулята. Гомогенизируют 500 см3 активного
ила 2 мин в блендере на средней скорости или в подходящем высокоскоростном смесителе. Оставляют
отстояться для того, чтобы надосадочная жидкость не содержала значительных количеств взвешенных
веществ, но в любом случае не менее 30 мин. Декантируют достаточный объем надосадочной жидко сти и
добавляют его в испытательные колбы так, чтобы получить концентрацию от 1 % до 5 % объемной доли в
испытательной среде. Следует избегать переноса частиц осадка.
Инокулят может быть предварительно кондиционирован, но в обычных условиях не следует ис
пользовать для этого предварительно экспонированный инокулят, особенно в случае стандартных ис
пытаний, имитирующих биоразложение в природных условиях. В зависимости от цели испытания до
пускается также использовать предварительно экспонированный инокулят при условии, что это должно
быть четко указано в протоколе испытаний (например, процент биоразложения = х %, с использова
нием предварительно экспонированного инокулята) и должен быть подробно описан метод предвари
тельного воздействия. Предварительно экспонированный инокулят может быть получен с помощью
подходящих лабораторных исследований биоразложения (см. [8]), проводимых в разных условиях, или из
образцов, полученных в соответствующих условиях окружающей среды (например, на загрязненных
территориях или на промышленных очистных сооружениях).
8.4 Проведение испытаний
Предусматривают несколько сосудов, чтобы испытания включали, как минимум, следующее:
a) три сосуда для испытуемого материала (обозначение FT);
b) три сосуда для контрольной пробы (обозначение FB);
c) два сосуда для проверки активности инокулята с использованием эталонного материала (обо
значение Fc ).
И при необходимости:
d) один сосуд для проверки возможного абиотического разложения или небиологических измене
ний в испытуемом материале, например в результате гидролиза (обозначается как Fs). Испытательный
раствор в Fs должен быть стерилизован, например, автоклавированием или добавлением подходящего
токсичного неорганического соединения для предотвращения микробной активности. Используют,
на пример, 5 см3/дм3 раствора, содержащего 10 г/дм3 хлорида ртути (II) (HgCI2). При необходимости
до бавляют такое же количество токсичного вещества во время испытания;
e) один сосуд в качестве отрицательного контроля (обозначается как FN) с использованием небио
разлагаемого полимера (например, полиэтилена) такой же формы, что и испытуемый материал;
f) один сосуд для проверки возможного ингибирующего действия испытуемого материала на ми
кробную активность (обозначается как F,). Следует обратить внимание, чтобы соотношение углерода в
испытуемом и эталонном материалах и азота в среде было примерно C:N = 40:1. При необходимости
добавляют азот.
Добавляют соответствующие количества испытательной среды (6.2) и инокулята (см. 8.3) в испы
тательные сосуды, как приведено в таблице 1.
Измеряют значение pH в сосудах и при необходимости доводят до 7. Помещают поглотитель
диоксида углерода (6.4) в емкость для поглотителя респирометра (см. приложение С). Вносят испыту
емый материал (см. 8.1), эталонный материал и материал отрицательного контроля (см. 8.2) в соответ
ствующие сосуды, как указано в таблице 1. При необходимости проведения анализа баланса углерода (см.
приложение Е) отбирают известный достаточный объем инокулированной испытательной среды из
7