ГОСТ Р ИСО 10718—2005
9.3Определение с помощью стерилизованной фильтрационной системы и обезвоженных
культуральных сред
9.3.1 Подготовка рекомендуемых сред
Готовят и стерилизуют рекомендуемые среды WLD (4.2) и M-Green (4.3), следуя инструкциям про
изводителя.
Добавляютдифенил(4.8), растворенный в 10%-мом раствореэтанола, ксредеWLD, чтобыдостичь
концентрациидифенила 30 ppm (млн-1).
Готовятчашки Петри.
9.3.2 Подготовка фильтрационной системы
Стерилизуют и готовят фильтрационную систему (5.1.2).
9.3.3 Посев на рекомендуемую среду WLD
В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соответствии с
разделом 8. используя стерильную мембрану. Помещают мембрану на чашку Петри со средой WLD.
Повторяют процедуру с каждой колбой.
9.3.4 Посев на рекомендуемую среду M-Green
В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соответствии с
разделом 8.используястерильную мембрану. ПомещаютмембрануначашкуПетри сосредойM-Green.
Повторяют процедуру с каждой колбой.
10 Контрольные исследования
Готовят контрольные исследованиядля каждой среды.
11 Инкубация
Переворачивают чашки Петри со средами WLD и M-Green и выдерживают в термостате (5.2) при
температуре (3012) °С в течение 3дней.
Наблюдают за ростом и подсчитывают колонии на каждой чашке каждые 24 ч.
12 Обработка результатов
12.1 Определение числа КОЕ бактерий на корковой пробке
Послеокончанияинкубацииподсчитываютколониибактерий накаждойчашкесо средойWLD. каж
дый разсравнивая результат с последним установленным показателем.
Для каждой чашки число колониеобразующих единиц (КОЕ) на корковой пробке определяют по
следующей формуле
где Na— общее число подсчитанных колоний бактерий;
4— число испытуемых корковых пробок.
За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение установленных показате
лей, полученныхдля каждой чашки, округленное вбольшую сторонудо ближайшего целого числа.
12.2 Определение числа КОЕдрожжевых и плесневых грибов на корковой пробке
После окончания инкубации подсчитывают колонии дрожжевых и плесневых грибов на каждой
чашке со средой M-Green. каждый раз сравнивая результатс последним установленным показателем.
Для каждой чашки число колониеобразующих единиц (КОЕ) на корковой пробке определяют по
следующей формуле
4
’
где Wv m— общее число колонийдрожжевых иплесневых грибов;
4 — число испытуемых корковых пробок.
За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение установленных показате
лей. полученныхдля каждой чашки, округленное в большую сторонудо ближайшего целого числа.
4