ГОСТ РИСО 10718—2005
7 Условия испытаний
Подготовку материалов к испытаниям и сами испытания проводят в асептических условиях и в
соответствиис требованиями ИСО 7218.
8 Экстрагирование
8.1 Готовятфизиологический раствор или раствор Рингера (4.1). При перемешиваниидобавляют
поверхностно-активное вещество (4.6)до получения концентрации 10 r/л. а затемдобавляют триптоно-
вый гель (4.7)до получения концентрации 1г/л. После этогос помощью винной кислоты (4.4)доводят pH
до 3—3.5. Наливают в каждую колбу (5.6) примерно по 90 мл раствора иподвергаютстерилизации.
8.2 После охлаждения в каждую колбу в асептических условиях добавляют по 10 мл этилового
спирта (4.5).
8.3 Помещаютв каждую колбупочетырекорковых пробки так. чтобыонибылиполностьюпогруже
ны в раствор. Встряхивают колбы в течение 1ч со скоростью от 140 до 160 об/мин при температуре от
20 °С до 25 °С.
Число колб зависит от выбранной схемы отбора проб. Половину колб используютдля посева на
рекомендуемую средуWLD, другую половину— для посева на рекомендуемую среду M-Green. Для каж
дой культуральной среды готовятдополнительную колбудля контрольного опыта.
9 Проведение испытаний
9.1 Общие рекомендации
Испытанияпроводятв соответствиис9.2с использованием стерильнойфильтрационнойсистемы
и стерильных культуральных сред, готовых к применению, а затем в соответствии с 9.3, используя
фильтрационную систему, которую предстоитстерилизовать, и обезвоженные культуральные среды.
9.2 Экспресс-определение с использованием фильтрационной системы и готовых к при
менению стерильных культуральных сред
9.2.1 Подготовка
Готовятфильтрационную систему (5.1.1).
9.2.2 Посев на рекомендуемую среду WLD
Подсоединяют наполненную воронку со стерильной мембраной к фильтрационной головке ваку
умного насоса. В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соот
ветствии с разделом 8. Вконце фильтрации отключают вакуум от линии отсасывания, чтобы установить
равновесие с атмосферным давлением.
Непосредственно перед посевом в рекомендуемую среду WLD (4.2) добавляют дифенил (4.8),
растворенный в 10%-ном растворе этанола, чтобы достичь концентрации дифенила 30 ppm (млн-1).
Добавляют рекомендуемуюсреду WLD. содержащуюся вампулах, ненадолгоподключаютк вакуумудля
отсасывания, затем отключают вакуум. Удаляют фильтрационную установку и вставляют пробку
фильтрационной системы в ее основание, чтобы не допустить реинфицирования. Убирают цилиндри
ческую часть воронки. Крышку воронки помещают в системуфильтр/чашка Петри.
Повторяютэту процедурус каждой колбой.
9.2.3 Посев на рекомендуемую среду M-Green
Подсоединяют наполненную воронку со стерильной мембраной к фильтрационной головке ваку
умного насоса. В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соот
ветствии с разделом 8. Вконце фильтрации отключают вакуум от линии отсасывания, чтобы установить
равновесиес атмосфернымдавлением. Добавляюткультуральнуюсреду M-Green(4.3), содержащуюся
в ампуле, ненадолго подключают к вакууму для отсасывания и затем отключают вакуум. Удаляют
фильтрационную установку и вставляют пробку фильтрационной системы в ее основание, чтобы не
допустить реинфицирования. Убирают цилиндрическую часть воронки. Крышку воронки помещают в
систему фильтр/чашка Петри.
Повторяютэту процедурус каждой колбой.
Обезвоженную культуральную среду вновь гидратируют с использованием стерилизованной и
деминерализованной воды.
з