ГОСТ ISO 13099-2—2016
В.1.4.3 Разбавление
В некоторых случаях, при использовании специальных типов ячеек, даже при малых углах рассеяния воз
можно измерение электрофоретической подвижности при умеренных концентрациях [9]. В большинстве случаев
прибор, который использует малоугловое рассеяние, требует, чтобы образец был растворен таким образом, чтобы
рассеянное излучение проходило через измерительную ячейку.
Дзета-потенциал является не только свойством частиц, но также зависит и от химического равновесия между
поверхностью частицы и жидкостью. Любое изменение в химическом составе жидкости и ионном составе влияет
на это равновесие и, следовательно, на дзета-потенциал.
Это является проблемой для методов, которые предполагают сильное разбавление образца. Растворение
может изменить химический состав жидкости, если не приняты специальные меры. В процессе пробоподготовки
необходимо следить за сохранением значения дзета-потенциала в исходном образце и в разведенном веществе.
Такая процедура требует сохранения идентичности не только частиц, но и жидкостей. Пробоподготовка так
же может сильно влиять на состав жидкости.
В пробоподготовке следует использовать так называемую равновесную процедуру разбавления, при которой
в исходной системе такая же жидкость, что и разбавитель. После растворения единственный параметр, который
изменяется, — это концентрация частиц. Только пробоподготовка на основе равновесного растворения обеспечи
вает значения дзета-потенциала, которые идентичны в исходной системе и разбавленном образце.
Есть два подхода к приготовлению жидкости, используемой для разбавления. Первый заключается в извле
чении жидкости после осаждения частиц путем седиментации или центрифугирования. Эта жидкость может быть
использована для разбавления исходного образца в той степени, которая является оптимальной для конкретного
метода измерения. Данный метод подходит для больших частиц с достаточно высокой концентрацией и менее при
меним для наночастиц и мягких биологических систем.
Другой подход связан с применением диализа и больше соответствует нано- и биодисперным системам.
Использование диализных мембран связано с тем, что они пропускают ионы и молекулы и не пропускают дис
персные частицы.
Необходимо представить отчет о подготовке образца и растворителя. Для принятия метода как стабильного
следует произвести несколько разведений и измерений образца.
В.2 Подтверждение результата измерений
В.2.1 Стандартные образцы
Стандартные образцы RM электрофоретической подвижности должны быть однородными и стабильными по
отношению к значениям электрофоретической подвижности, которые измерены с учетом времени и температуры.
Принятое значение электрофоретической подвижности должно быть получено несколькими операторами и строго
доказано. Материал должен быть задокументирован с точки зрения процедуры подготовки образца, и при необхо
димости должен быть предоставлен измерительный протокол.
Сертифицированные стандартные образцы CRM электрофоретической подвижности используют в целях кали
бровки оборудования, проверки допустимости измерительных методов и присвоения значений исследуемым матери
алам. Это должно сопровождаться аттестованной методикой измерений электрофоретической подвижности, которая
относится к данному измерительному оборудованию и учитывает неопределенности на доверительном интервале.
В.2.2 Повторяемость
Чтобы достигнуть желаемой повторяемости электрофоретической подвижности, необходимо провести сле
дующие операции:
a) установить прибор, включить и выдержать в соответствии с требованиями технической документации;
b
) изучить измерительный протокол, прилагаемый к исследуемому материалу;
c) выполнить три последовательных измерения при одних и тех же условиях.
Прибор соответствует требованиям В.2, если коэффициент вариации CV для средних значений электрофо
ретической подвижности от каждого измерения для стандартного образца составляет менее 10 % при условии, что
абсолютное значение подвижности выше, чем 2-10-8 м2/В-с.
В.2.3 Воспроизводимость
Проверка воспроизводимости должна соответствовать требованиям В.2.2, за исключением того, что исполь
зуют разные объемы образца и разные степени разбавления.
Прибор соответствует требованиям В.2, если коэффициент вариации CV для средних значений электрофо
ретической подвижности от каждого измерения для стандартного образца составляет менее 15 % при условии, что
абсолютное значение подвижности выше, чем 2-10-8 м2/В-с.
В.2.4 Достоверность
Достоверность работы прибора определяют согласно стандартам, поддерживаемым национальными органа
ми по стандартизации или другими центрами, сертифицируемыми в соответствии с национальными или междуна
родными стандартами правил измерения, с использованием твердых сферических частиц с однородным составом
12