ГОСТ Р 57166—2016
Химически чистая посуда для отбора проб и биотестирования хранится с закрытыми стеклянны
ми притертыми пробками или завинчивающимися крышками в защищенных от пыли ящиках лабора
торного стола или на закрытых полках, стеллажах и т. п. Срок хранения не ограничен.
5.3.2 Проверка физиологической чувствительности тест-организмов
Периодически (не реже одного раза в месяц), а также непосредственно перед тестированием,
синхронизированную культуру (В.2.1. приложение В) суточных тест-организмов Paramecium caudatum
Ehrenberg проверяют на физиологическую чувствительность. Для этого определяют среднюю леталь
ную концентрацию
Л
К50 за 24 ч тестирования (24 ч
Л
К50) модельного токсиканта (двухромовокислого
калия), как указано ниже.
5.3.2.1 Готовят исходный раствор модельного токсиканта массовой концентрацией 1 г/дм3сле
дующим способом: в мерную колбу вместимостью 1000 см3вносят 1 г двухромовокислого калия и рас
творяют в небольшом количестве дистиллированной (деионизированной) воды (см. 5.2), затем
доводят содержимое колбы до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают и маркиру
ют. Срок хранения исходного раствора модельного токсиканта — не более 7 сут.
5.3.2.2 Готовят анализируемые растворы модельного токсиканта (двухромовокислого калия)
заданной концентрации в следующей последовательности:
- приготавливают растворы модельного токсиканта двухромовокислого калия массовой концен
трацией от 100,0 до 300,0 мг/дм3следующим способом:
в пять емкостей вместимостью более 50 см3мерным цилиндром вносят различные объемы мине
ральной среды
Л
озина-
Л
озинского (см. приложение Б) и исходного раствора двухромовокислого калия
массовой концентрацией 1 г/дм3(см. 5.3.2.1) в соответствии с таблицей Г.1 приложения Г. При этом
содержимое каждой емкости тщательно перемешивают. В каждой емкости массовая концентрация
приготовленного раствора модельного токсиканта (двухромовокислого калия) составляет соответ
ственно: 100,0; 150.0; 200.0; 250,0 и 300.0 мг/дм3;
- для каждой приготовленной концентрации модельного токсиканта (двухромовокислого калия)
готовят три емкости вместимостью 25 см3 каждая и вносятанализируемые растворы следующим обра
зом: в каждую емкостьдобавляют по 10 см3 конкретного раствора модельного токсиканта (двухромово
кислого калия), после чего помещают в них по 10 экземпляров тест-организмов.
Анализируемые водные растворы различных концентраций двухромовокислого калия и кон
трольной пробы готовят непосредственно перед определением физиологической чувствительности
тест-организмов.
Для приготовления контрольной пробы используют минеральную среду
Л
озина-
Л
озинского
(см. приложение В).
Для каждой концентрации анализируемых растворов двухромовокислого калия и контрольной
пробы при тестировании используют не менее трех емкостей.
Пример приготовления анализируемых концентраций модельного токсиканта приведен в Г.1
(приложение Г).
5.3.2.3 Проверку физиологической чувствительности тест-организмов проводят аналогично тес
тированию анализируемых проб продолжительностью 24 ч (см. 5.4.3).
5.3.2.4 Подсчитывают число выживших тест-организмов аналогично подсчету тест-организмов
по оценке токсичности анализируемых проб по 5.4.3.5 и определяют значение 24 ч
Л
К50 модельного
токсиканта (двухромовокислого калия), при этом:
-если значение 24 ч
Л
К50 данного модельного токсиканта находится в диапазоне от 170.0 до
250.0 мг/дм3,то считают, что подготовленные тест-организмы пригодны для тестирования;
- если значение 24 ч
Л
К50данного модельного токсиканта не входит в указанный диапазон, то тог
да считают, что подготовленные тест-организмы не пригодны для тестирования. Проверяют соблюде
ние правильности процедуры тестирования, условия подготовки тест-организмов к тестированию и,
при необходимости, повторяют тестирование с использованием обновленной культуры инфузорий
Paramecium caudatum Ehrenberg.
Пример определения значения 24 ч
Л
К^ модельного токсиканта приведен в А.1 приложения А.
П р и м е ч а н и е — Значение 24 ч
Л
К^ раствора модельного токсиканта указывают в протоколе испытаний
с датой определения данной токсикометрмческой характеристики, чтобы подтвердить соответствие физиологичес
кой чувствительности тест-организмов, использованных для получения представленных а протоколе результатов,
требованиям настоящего стандарта.
5.3.2.5 Если по результатам тестирования не удалось получить конкретное значение 24 ч
Л
К50,
тодля определения 24 ч
Л
К50 модельного токсиканта получают результаты обработкой с применением
метода математической статистики — пробит-анализ. Пример приведен в А.З приложения А.
6