ГОСТ 31955—2012
4.2 Фильтрация и инкубация
Исследуемые объемы пробы питьевой воды фильтруют через мембраны, удерживающие микро
организмы.
При испытаниях по стандартному тесту мембрану помещают на селективную лактозную ав и зо
ванную культуральную среду и проводят инкубацию отфильтрованных микроорганизмов при темпера
туре (36 i 2) °С в течение (21 • 3) ч; при испытаниях по ускоренному тесту мембрану помещают на
агаризованную среду, содержащую казеин трипсиновой ферментации, и проводят инкубацию при тем
пературе (36 * 2) °С в течение 4—5 ч с последующей инкубацией при температуре (44,0 ± 0,5) вС в
течение 19—20 чнаагаризованной среде,содержащейказеин трипсиновойферментации исоли желчи.
4.3 Оценка и подтверждение (стандартный тест)
Характерные колонии (8.3.2) на мембране учитывают как колонии лактозоположительных бакте
рий. Для подтверждения наличия колиформных бактерий иE.coliвыполняют пересев случайно выбран
ных характерных колоний и проводят испытания, подтверждающие отсутствие их оксидаэной
активности и образование индола. Вычисляют количество колиформных бактерий иЕ.соЧв 100 мл
про быпитьевой воды.
4.4 Оценка и подтверждение (ускоренный тест)
Колонии на мембране, обладающие свойством образовывать индол из внесенного вагаризован
ную среду L-триптофана, учитывают как колонии E.coli. Вычисляют количество E.coli в 100 мл пробы
питьевой воды.
5 Оборудование, материалы
Для проведения испытаний применяют обычное микробиологическое оборудование, вчастности,
указанное ниже:
5.1 Стерилизатор паровой.
5.2 Водяная баня или термостат, обеспечивающие поддержание температуры (36 ± 2) °С.
5.3 Водяная баня или термостат, обеспечивающие поддержание температуры (44,0 ± 0,5) еС.
П р и м е ч а н и е — Для ускоренного теста вместо термостатов, указанных в 5.2 и 5.3, допускается использо
вать программируемый термостат, обеспечивающий смену режимов инкубации через определенный интервал вре
мени и поддержание температуры (36 = 2) °С и (44,0 ± 0.5) *С.
5.4 pH-метр, обеспечивающий измерение водородного показателя pH с допускаемой погрешнос
тью ±0,1.
5.5 Оборудованиедля мембранной фильтрации*.
5.6 Фильтры* мембранные, изготовленные из эфирцеллюлозных материалов, диаметром, как
правило, от 47 до 50 мм. с номинальным диаметром пор 0,45 мкм. и, предпочтительно, с нанесенной сет
кой (для концентрирования микроорганизмов).
5.7 Фильтры мембранные с номинальным диаметром пор 0.2 мкм (для стерилизации
растворов).
5.8 Пинцет плоскоконечный для работы с мембранными фильтрами.
П р и м е ч а н и е — Мембранныефильтры не должны обладать свойствами, ингибирующими илистимули-
рующими рост микроорганизмов. Чернила, используемые для нанесения сетки, не должны оказывать влияние на
рост бактерий. Если мембранные фильтры поставляют нестерильными, их следует простерилиэовать е соотве
тствии с инструкциями изготовителя. Качество каждой партии мембран следует контролировать’*, поскольку и-
спользование различных торговых марок фильтров может привести к различиям в формировании колоний и их
окраски.
При ускоренном тесте для лучшего выявления образования окраски используют мембранныефильтры зеле
ного цвета.
5.9 Лампа ультрафиолетовая с длиной волны 254 нм.
П р и м е ч а н и е — При работе с ультрафиолетовой лампой используют защитные очки и перчатки, так как
ультрафиолетовое излучение вызывает раздражение глаз и кожи.
5.10 Подложки под фильтры диаметром не менее диаметра используемого фильтра.
’ В Российской Федерации — согласно (1).
" В Российской Федерации — согласно (2).
3