ГОСТ 31955—2012
П р и м е ч а н и е — Допускается применять исходные вещества для приготовления культуральных сред и
реактивы другой степени чистоты при условии отсутствия различий в результатах испытаний.
Для приготовления культуральных сред и реактивов применяют дистиллированную воду ло
ГОСТ 6709 или деионизированную воду, не содержащую веществ, способных ингибировать рост бакте
рий в условиях проведения испытаний. Удельная электрическая проводимость воды, используемой
для приготовления культуральных сред иреактивов, должна составлять не болев 3.0 мкСм/см. Дис
тиллированную или деионизированную воду хранят встеклянной посуде.
Если неуказано иное, приготовленные поприложению В культуральные среды иреактивы являют
ся стабильными не менее одного месяца, при хранении взащищенном от света и высыхания месте при
температуре (5 ± 3) °С.
7 Отбор проб
Пробы питьевой воды отбирают и транспортируют всоответствии с требованиями ГОСТ31942.
8 Проведение испытаний
8.1 Подготовка пробы воды и мембранных фильтров
Подготовку пробы воды и мембранных фильтров перед фильтрацией и посевом микроорганиз
мов на селективные среды проводят всоответствии с ГОСТ 31942*.
Испытания проводят сразу после отбора проб.
Если пробы транспортируют и хранят при температуре окружающей среды не выше 25 еС в защи
щенном от света месте, то испытания начинают не позднее чем через 2 чпосле отбора пробы.
В исключительных случаях пробыдопускается хранить при температуре (5 ± 3) °С не более б чдо
начала проведения испытаний.
8.2 Фильтрация
Фильтруют 100 мл или больший объем исследуемой пробы (например. 300мл — для воды, расфа
сованной вемкости), используя мембранный фильтр иоборудованиедля мембранной фильтрации.
Прифильтрацииводынеизвестногокачествацелесообразно увеличить количествофильтру
емых объемовдля получения изолированных колонийна фильтре (например 10. 40.100.150 мл пробы
воды).
После окончания фильтрации мембранный фильтр помещают на соответствующую авизован
нуюсреду по8.3 или8.4, обеспечивая отсутствие пузырьков воздуха под мембранным фильтром.
8.3 Инкубация и подтверждение (стандартный тест)
8.3.1 После фильтрации по 8.2 помещают мембранный фильтр на чашку Петри с лактозным ТТХ
агаром с гептадецилсульфатом натрия (далее — среда с тергитолом 7), приготовленным no В.1 (прило
жение В), и проводят инкубацию посева микроорганизмов при температуре (36 ±2) °С в течение (21
i 3) ч.Вместо среды стергитолом 7 допускаетсяприменять среду Эндо.
П р и м е ч а н и я
1 Если после инкубации посева микроорганизмов в течение (21 г 3)ч не обнаружены типичные колонии мик
роорганизмов. то увеличивают продолжительность инкубации до (44 ± 4
)
ч. что может привести к повышению
чувствительности метода.
2 Для обнаружения Е.соН допускается использовать дополнительный мембранный фильтр для инкубации
посева микроорганизмов при температуре
44
*С. что будет способствовать подавлению роста сопутствующих
микроорганизмов.
8.3.2 После окончания инкубации учитывают как колонии лактозоположительных бактерий все
выросшие характерные колонии микроорганизмов независимо от размера.
- на среде с тергитолом 7 — колонии с желто-оранжевой, кирпично-красной окраской, иногда с
ржаво-окрашенным центром, образующие желтую окраску всреде под мембраной (отпечаток):
- на среде Эндо — колонии с темно-красной окраской с металлическим блеском или без него,
слизистые скрасным центром и отпечатком на оборотнойстороне фильтра.
’ В Российской Федерации — также с учетом требований (1) и ГОСТ Р 51426 (при необходимости разве
дения пробы).
5