ГОСТ ISO 9231—2015
Метанолом (5.1) доводят раствор до метки и снова перемешивают. Раствор оставляют на 15 мин.
Надосадочную жидкость фильтруют при помощи мембранных фильтров (6.7).
9.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
ВЭЖХ-анализ проводят при комнатной температуре с использованием подвижной фазы (5.4) и
скоростью потока 1.2 см3/мин. Перед началом анализа в течение 30 мин. хроматографическую систему
промывают элюирующим раствором до установления стабильной нулевой линии.
Затем хроматографируют прозрачный раствор пробы, подготовленной по 9.1. и рабочий градуиро
вочный раствор (5.7.2). инжектируя равные объемы в диапазоне от 5до 20 мм3. Выходящий из колонки
элюат анализируют УФ-детектором при длинах волн 227 и 250 нм. используя последовательное детек
тирование при настройках на дво длины волны или одновременное двухволновое детектирование.
П р и м е ч а н и е — Для проверки линейности градуировочного графика проводят точечную градуировку.
Количество метанола в стандартных растворах и испытуемом образце намного выше, чем в под
вижной фазе, что в некоторых случаях может повлиять на форму и разделение пиков. В таких слу чаях
проверяют форму и разделение пиков, сравнивая их с пиками, полученными при хроматогра
фировании стандартного раствора (5.7.1). в котором метанол (5.1) замещен на мобильную фазу (5.4) в
эквивалентном количестве.
В данныхусловияхориентировочноевремяудерживаниябензойнойисорбиновойкислотсоставля
ет 5.5 и 7мин.соответственно. Если пики выходятза пределы градуировочного графика, образец разбав
ляют необходимым объемом 50 % водного метанола и вводят в хроматограф от 5 до 20
мм3полученного раствора для получения пиков нужной высоты.
Чтобы определить, элюируются ли в пробе какие-либо мешающие компоненты одновременно с
сорбиновой кислотой, проверяют отношение УФ-сигналов при длине волны 250 и 227 нм.
В ходе анализа молока или сухого молока на хроматограмме после 8 мин. удерживания появля
ется третий пик. Этот пик соответствует природному продукту — гилпуровой кислоте. Пик гиппуровой
кислоты может частично накладываться на сорбиновую кислоту. Поэтому разрешение сорбиновой и
гиппуровой кислот на колонке должно быть больше 1.
10 Обработка результатов
Содержание сорбиновой кислоты iv5 и/или бензойной кислоты w6. выраженное в миллиграммах
на килограмм, рассчитывают по формуле:
Нц
К ) =
Hit т V2
где Hls — высота или площадь пика, в соответствующих единицах, полученные для испытуемого рас
твора (см. 9.2);
Hsl — высота или площадь пика, в соответствующих единицах, полученные для рабочего стан
дартного раствора (см. 9.2);
ms — масса, в микрограммах, введенного рабочего стандартного раствора (5.7.2);
т— масса, в граммах, испытуемого образца (см. 8.1 или 8.2);
У,— объем, в см3, экстракта, приготовленного в 9.1 (= 100 см3);
V2— объем, в мм3, введенного испытуемого раствора,
1000 — коэффициент пересчета миллилитров в микролитры.
Результаты испытания представляют с точностью до целого числа.
11 Прецизионность метода
11.1 Межлабораторные испытания
Значения, полученные в ходе межлабораторных испытаний, могут быть не применимы для иных,
отличных от указанных, матриц и уровней содержания кислот.
Значения повторяемости и воспроизводимости были получены на основании результатов двух
межлабораторных испытаний, проводимых в 1984 и 2004 годах (см. приложение А). Испытания прово
дились на образцах с уровнем содержания бензойной исорбиновой кислот в пределахот 6 до 920 мг/кг.
4