ГОСТ Р 57202—2016
- калий фосфорнокислыйдвузамещеммый 3-водный поГОСТ 2493;
- калия гидрат окиси технический (едкий калий) по ГОСТ9285;
- калий марганцовокислый по ГОСТ 20490;
- спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ Р 55878;
- формалин по ГОСТ 1625;
- вода питьевая по ГОСТ Р51232 (далее — вода);
- контрольный образец битоксибациллина (далее — контрольныйобразец).
5.6.2 Подготовка киспытанию
5.6.2.1В качестве контрольного образца использовать битоксибациллина в 1 г которого содер
жится не менее 90 млрд жизнеспособных спор илетальная концентрация (ЛК^) для гусениц непарного
шелкопряда второго возраста составляет не более 0.023 мг на 1 г питательной среды на 6-е сутки при
температуре (2111) °С.
Биологическую активность контрольного образца принимают за 2700 ЕА.
Отбор контрольного образца и определение его качества проводят совместно головной институт
и завод-изготовитель.
Качествоконтрольногообразца удостоверяютактом.
Контрольныйобразец хранят в герметичной посуде при температуре (612) "С.
Периодически раз в 3 месяца контрольный образец подлежит проверке.
Допускаются сезонные колебания показателяЛК50до 0,036 мг на 1г питательнойсреды ипадение
числа жизнеспособных спор на 20 %.
5.62.2 В качестве тест-объекта для оценки битоксибациллина (далее тест-объект) используют
1-дневных гусениц непарного шелкопряда второго возраста, отродившихся из одной популяции вида и
выращенныхна искусственном корме.
5.6.2.3 Сбор яйцекладок природной популяции непарного шелкопряда производится в очагах с
нарастающей численностью в одном районе в одно время (в сентябре—октябре). Для лабораторного
разведения тест-объекта пригодны кладки яиц с массой 0,7—0,9 мг и количеством в кладке не
менее 400 штук.
Недопускаетсясборяйцеклетокв очагах, обработанныхинсектицидами, при массовом заражении
гусениц илибабочек.
5.6.2.4 На месте сбора яйцеклетки просушивают на стеллажах в помещении и хранят в сухом
затемненном месте.
5.6.2.5 Собранные яйцеклетки в лаборатории обеззараживают под бактерицидной лампой в
течение (24 ± 1) ч, расфасовывают по 100—300 г в бумажные пакеты и помещают в холодильник. Для
использования вдекабре—январе яйцеклетки реактивируют в следующем режиме:
1—2 недели — притемпературе 3 °С—5 °С;
1—2 недели — при температуре 0 °С;
2 недели — притемпературе минусе — минус 10вС.
Далее яйцеклетки хранят в холодильнике при температуре 0 °С—5 °С.
Для использования яйцеклеток в более поздние сроки их помещают в холодильник и постоянно
хранят при температуре0 °С—5 °С.
5.6.2.6 Для опыта навеска яиц массой 5—7 г освобождают от пушка путем легкого трения в кап
роновом мешочке под струей воды при температуре 20 “С—30 °С.
5.6.2.7 Очищенные яйца обеззараживают в течение 15 мин в растворе 1;140 %-ного водного рас
твора формалина и 95 %-могоэтилового спирта с последующей промывкой в проточной воде при темпе
ратуре 20 °С—30 °С в течение 15—20 мин.
Затем яйца высыпают на фильтровальную бумагу, просушивают в чистом помещении 30 мин и
помещают в чашку Петри на фильтровальную бумагу с вырезанным сектором, в который вкладывают
ватныйтампон, смоченный0.1 %-мым раствором марганцовокислогокалия. Тампон недолжен касаться
бумаги.
5.6.2.8 Чашку Петри помещают в климатическую камерупри температуре (2111) °С, относитель
ной влажности воздуха 70 %—90 % в равномерном освещении камеры лампами дневного света осве
щенностью не менее 100 лк в течение 18 ч в сутки ивыдерживаютдо начала отрождения гусениц.
5.6 2.9 В период массового отрождения гусениц их рассаживаютв чашки Петри по 150—200 штук,
в которыепредварительно наносят питательную среду толщиной 3—5 мм кольцом от 1/3 до 2/3диамет
ра чашки Петри. Гусеницсодержит в климатический камере при режимахпо 5.6.2.8 без смены корма.
6