ГОСТ Р 57072—2016
Из разведений (10Л 10’5, 10 6) стерильной пипеткой по 1 см3 раствора переносят в 3 чашки
Петри, а затем заливают стерильной расплавленной и охлажденной до 50—60 СС средой. Круговыми
движениями чашек Петри в них перемешивают среду иоставляют на столе до застывания агара. Чашки
со средами помещают в термостат и выдерживают при 37 °С в течение 2—4 суток. Затем производят
подсчет выросших колоний с помощью прибора для подсчета колоний.
Испытания проводят в двух параллельных повторностях. Подсчитывают число колоний Bacillus
subtilis.
Число жизнеспособных клеток (КОЕ) бактерий в 1 г препарата (X) вычисляют по формуле:
X = (а, 10"+а2 10"+ 33 10")/3.
где а,. а2. а3 — количество колоний в учитываемом разведении;
10° — кратность разведения, в котором учитывается рост.
Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны пре
вышать 20 % по отношению к большему значению. В противном случае измерения повторяют.
За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое значение результа
тов двух параллельных измерений.
В 1 г пробиотика «Субтилин» количество колониеобразующих единиц Bacillus subtilis должно быть не
менее 1 •10е.
7.4 Определение подлинности бактерий рода Bacillus.
Определение подлинности бактерий рода Bacillus проводятпо ГОСТ31928 (по пункту 10.6).
7.5 Определение количественного содержания пробиотических микроорганизмов (КОЕ/г) в про
биотике «Ацидофил».
Приготовление питательной агариэованной среды Бликфельдта проводят по ГОСТ 10444.11 (по
пункту 5.4).
Пробиотик «Ацидофил» массой 0.1 г помещают в стерильную колбу вместимостью 250 см3, до
бавляют 50 см3стерильного физиологического раствора и перемешивают в течение 10 мин на аппарате
для встряхивания колб при 200 об/мин. Затем объем содержимого колбы доводят до 100 см3стериль
ным физиологическим раствором. Концентрация препарата в приготовленной суспензии составляет
0.01 г/см3, затем путем последовательных разведений из нее готовят разведения (10"4.10~5.10~6).
Для каждого разведения в стерильную чашку Петри переносят с помощью стерильной пипетки
1см3пробы для анализа. Заливают в каждую чашку Петри приблизительно 15 см3 плотной среды, ко
торая приготовлена и охлаждена до температуры приблизительно 47 °С на водяной бане.
Тщательно перемешивают посевной материал со средой и дают смеси застыть на горизонтальной
поверхности. Переворачивают засеянные чашки Петри (донышком вверх) и помещают в термостат. По
севы инкубируют при температуре (30±1) °С не более 5 сут.
Затем производят подсчет выросших колоний с помощью прибора для подсчета колоний.
Испытания проводят в двух параллельных повторностях. Подсчитывают число колоний Lactoba
cillus acidophillus.
Число жизнеспособных клеток (КОЕ) бактерий в 1 г препарата (X) вычисляют по формуле:
X = (а, 10" + а2 10" ♦ а3 10")/3.
где а,. а2. а3— количество колоний в учитываемом разведении:
10" — кратность разведения, в котором учитывается рост.
Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны пре
вышать 20 % по отношению к большему значению. В противном случае измерения повторяют.
За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое значение результа
тов двух параллельных измерений.
В 1г пробиотика «Ацидофил» количество колониеобразующих единиц Lactobacillus acidophilus долж
но быть не менее 1 •106.
7.6 Определение подлинности бактерий рода Lactobacillus.
Определение подлинности бактерий рода Lactobacillus проводят по ГОСТ 31928 (по пункту10.2).
7.7 Наличие посторонней микрофлоры в пробиотиках «Субтилин» и «Ацидофил» опредояют по
методам, изложенным в ГОСТ Р 55291.
7.8 Определение безвредности пробиотиков «Субтилин» и «Ацидофил».
Для проведения испытания используют материалы и животных по ГОСТ 31926.
6