ГОСТ 33406—2015
8.4 Подготовка хроматографа к работе
Жидкостной хроматограф настраивают всоответствии с инструкциями фирмы — производителя
оборудования.
8.4.1 Условия хроматографического анализа
Используют колонку и хроматографические условия разделения, обеспечивающие удовлетвори
тельное разделение многокомпонентной смеси красителей. — см. рисунок А.1 (приложение А).
Элюенты:
- А = ацетонитрил по 8.2.1;
-
В
= 0,01 М NaH2P04 + 0,001 М Тетрабутиламмония гидроксида, 4,4 ед. pH, приготовленный
по 8.2.2.
Градиент:
- 15% в;
- 10 мин 40% В;
- 14 мин 90 % В;
- 19 мин 90% В;
- 20 мин 15 % в.
Скорость потока: 1,0 см3/мин.
Температура: 40 °С.
«Post timor>: 4 мин.
Детектирование: UV-DAD.
450 нм/20 нм.
520 нм/20 нм.
Для детектирования красителей применяют диодно-матричный детектор, устанавливают длины
волн поглощения, обеспечивающие максимальную чувствительность и селективность. Значения длин
волн, используемые вданном методе, представлены в таблице 3.
Т а б л и ц а 3
Название
Длина волны детектироаания.’ширина полосы, нм
Солнечный закат £ 110
520/20
Тартразин Е 102
450/20
Амарант Е 123
520/20
Понсо 4R Е 124
520/20
Азорубин Е 122
520/20
Эритроэин Е127
520/20
Красный очаровательный Е129
520/20
8.4.2 Выполнение начальной градуировки
Для определения рабочегодиапазона массовых концентраций илинейности функции градуировки
выполняют начальную градуировку хроматографа. Ее выполняют как минимум по пяти рабочим градуи
ровочным растворам красителей, приготовленным по 8.3.2. Каждый раствор хроматографируют не
менее двух раз. Градуировочная зависимость должна иметь вид у = Ьх. Параметры градуировочной
зависимости вычисляют путем анализа линейной регрессии скорректированных площадей пиков. Пра
вильность построения градуировочного графика контролируется значением достоверности аппрокси
мации: R2 £ 0.999.
8.5 Подготовка проб
Пробы алкогольной и безалкогольной продукции, соков разбавляют вдва—пять раз дистиллиро
ванной водой ифильтруют через мембранный фильтрd=25 мм, d=0,25 мкм. Навескупродуктов пере
работки фруктов, ягод и овощей, вкусоароматических добавок разбавляют в 5— 10 раз
дистиллированной водой. Полученный раствор помещают в ультазвуковую баню на 10—15 мин. При
необходимости проводят предварительную очистку проб центрифугированием. Подготовленную пробу
фильтруют через систему шприц-фильтр (используя мембранный фильтр d = 25 мм, dnop= 0.25 мкм) в
виалу для автосамплера. Подготовленная проба должна быть прозрачной.
5