ГОСТ 33607—2015
Перед проведением анализа элюенты дегазируют на ультразвуковой бане.
Готовые растворыхранятвконическихколбахс притертымипробкамивместимостью 1000см3,при
температуре (4 i 2) X не более месяца.
8.3 Подготовка пробы
8.3.1 Выделение бета-агонистов из продукта
Пробу массой 5 г. взвешенную с точностью до 0.01 г. помещают в центрифужную пробирку вмести
мостью 50см3.Добавляют20см3раствораацетатанатрияактивной кислотностью 5.2 ед. pH. итщатель
но перемешивают. Добавляют 0.250 см3бета-глюкорнидазы. перемешивают и ставят на водяную баню
при температуре 37 X на 16 ч.
Гидролизат центрифугируют 5 минс центробежным ускорением 4000 д.Далее4 см3супернатанта
отбирают в центрифужную пробирку вместимостью 15см3.добавляют5 см3 растворахлорной кислоты,
доводят pH концентрированной хлорной кислотой до (1 ± 0.3) ед. pH. Затем пробу центрифугируют вт
ечение 10 мин. Супернатант переносят в пробирку вместимостью 50 см3,доводя pH до 11 раствором
гидроксида натрия. В пробиркудобавляют 10см3 раствора хлорида натрия и 10см3 смеси изопропило
вогоспиртасэтилацетатом. перемешивают, центрифугируют 5мин. Органическийслой изопропилового
спиртас этилацетатом переносятв круглодоннуюколбу. Экстракцию повторяют дважды, экстракты объ
единяютиупариваютна роторномиспарителе при40 X . Сухой остатокрастворяютв 5см3раствора аце
татанатрияактивнойкислотностью 5,2ед. pH. и проводятпроцедурутвердофазнойэкстракции (ТФЭ).
8.3.2 Очистка пробы методом ТФЭ
Картриджи ТФЭ предварительно активируют, пропуская 3 см3 метанола, затем 3см3дистиллиро
ванной воды. Анализируемый растворнаносятна картриджсоскоростью 1см3/мии. Картриджпромыва
ют, пропуская 2 см3дистиллированнойводы и2 см3 раствора 2 %-ной муравьиной кислоты, отбрасывая
смывы. Аналиты элюируют 5см3 5 %-ного раствора аммиака в метанолесо скоростью 1см3/мин ипере
носятв круглодонную колбу. Растворупариваютдосуха на роторном испарителепри температуре40 X .
К сухому остатку приливают 1см3смеси 1%-ной муравьиной кислоты с метанолом. Ставят на 5 мин на
ультразвуковую банюдо полногорастворенияостатка. Растворпропускаютчерезмембранныйфильтрс
диаметром пор0.45мкм вхроматографическую виалу вместимостью2 см3для ВЭЖХ-МС/МСанализа.
9 Проведение измерений
9.1 Хроматографические условия измерений
Условия проведения ВЭЖХ-МС/МС анализа подбираются в зависимости от вида применяемого
жидкостного хроматографа, масс-слектрометрического детектора и хроматографической колонки.
В качестве примера могут быть приведены следующие условия определения бета-агонистов,
выполненные на системе ВЭЖХ-МС/МС с хроматографической колонкой С18. 4,6 х 50 мм. 1,8 мкм.
Разделение проводят в режиме градиентного элюирования (приготовление растворов элюентов
по 8.1.2). Объем вводимой пробы — 0,01 см3.
Т а б л и ц а 1 — Параметры и условия ВЭЖХ
Скорость потока.
см*/мин
Температура колонки.
-с
Соотношение компонентов подвижной фазы
Время, мим
А .%В. %
09820.440
0.59820.440
465350.440
520800.440
710900.440
7.5982
0.4
40
129820.440
6