ГО СТ 33634— 2015
2.00 г гомогенизированной пробы помещают в попипропиленоаую пробирку вместимостью 15 см3. Вносят
8 см3 смеси ацетонитрила и раствора натрия гидроксида (см. 8.2.5). перемешивают в течение 2 мин на
шейкере вортексного типа, после чего перемешивают на переворачивающем шейкере в течение 10 мин
Центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин при температуре 15 ‘С
♦
3 см3надосадочной жидкости переносят в новую полипропиленовую пробирку вместимостью 15 смл,
добавляют 3.0 см5фосфатного буферного раствора (см. 8.2.2) и 6 см3дихлорметана. Перемешивают на
переворачивающем шейкере в течение 10 мин
Центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин при температуре 15 ‘С
Удаляют верхний водный слой и промежуточную фазу. Переносят 3 см3нижнего органического слоя в новую
полипропиленовую пробирку вместимостью 15 см3и упаривают досуха в токе азота в системе упаривания при
температуре 50 "С
К сухому остатку добавляют 0.3 см3раствора N9 3 (см. приложение А) и тщательно перемешивают на шейкере
вортексного типа до полного растворения
*
Полученный экстракт обезжиривают. Для этого приливают 0.3 см3гексана и центрифугируют при 4000 об/мин
в течение 10 мин при температуре 15 ‘С. Удаляют верхний гексановый слой. Процедуру обезжиривания
повторяют еще раз
*
В пробирку типа «Эппендорф» отбирают 0.03 см’ обезжиренного экстракта, добавляют 0.27 см3рабочего
буферного раствора (см. 8.2.4), перемешивают и используют для проведении ИФА в соответствии с
разделом 9
Рисунок 1— Обработка испытуемых проб
8.4.2 Подготовка проб молока
Отобранную пробу молока перед анализом тщательно перемешивают.
В полипропиленовую пробиркувместимостью 15см3вносят 2см3пробы. 8 см3смесиацетонитрила
и раствора натрия гидроксида (см. 8.2.5), гомогенизируют в течение 2 мин. после чего перемешивают на
шейкере вортексноготипа втечение 10мин.Далее процедуру экстракции и обезжиривания пробы прово
дят согласно рисунку 1.
9 Проведение иммуноферментногоанализа
9.1 Общие положения
9.1.1 При проведении испытаний следует использовать реагенты и компоненты, входящие в один
и тот же набор (тест-систему). Разбавление или замена реагентов из набора (тест-системы) другой
серии не допускается.
9.1.2 Наборы (тест-системы) следует хранить при температуре от 2 °С до 8 вС в пределах срока
хранения.
9.1.3 Окрашивание раствора субстрата № 11 (см. приложение А) является признаком его порчи и
делает невозможным его применениедля анализа.
9.2 Подготовка тест-системы к проведению анализа
9.2.1 Перед использованием тест-систему вынимают из холодильника и выдерживают при ком
натной температуре не менее 30 мин. после чего аккуратно встряхивают каждый флакон. Реактив № 2
(см. приложениеА) необходимо прогреть в сушильном шкафу при температуре 37 °Сдо полного раство
рения кристаллов солей и тщательно перемешать.
9.2.2 После использования, реагенты тест-системы сразу помещают вхолодильник.
6