ГО СТ 33634— 2015
9.2.3 На всех стадиях необходимо избегать воздействия прямого солнечного света.
9.2.4 Для каждого реактива и раствора используют отдельные съемные наконечники автомати
ческих пипеток. Внесение растворов в лунки проводят осторожно, не касаясь наконечниками их дна и
стенок.
9.2.5 Каждый исследуемый рабочий раствор экстрактов испытуемых проб анализируют в двух
повторностях.
П р и м е ч а н и е — Далее приведены расходы реактивов надва стрилаЧ чтодостаточно для анализадвух
исследуемых проб. Для другого числа проб количество используемых стрилоа и смешиваемых объемов реагентов
изменяют в соответствии с количеством исследуемых проб.
9.3 Проведение испытания
9.3.1 Из планшета извлекают необходимое число стрипов. Неиспользованные стрипы хранят в
закрытом фольгированном полиэтиленовом пакете с зип-локом2) при температуре от 2 °Сдо 8 °С в тече
ние срока годности тест-системы.
9.3.2 В лунки планшета вносят по 0.05 см3рабочих градуировочных растворов (8.2.6) и по 0,05 см3
растворов экстрактов испытуемых проб.
Каждый раствор вносят в двойной повторности (лунки-дубли).
Внесение растворов проводят согласно приложению Б.
Далее в каждую лунку вносят по 0,05 см3 раствора No 1 (см. приложение А). Стрипы заклеивают
пленкой или закрывают крышкой, инкубируют в термостате при температуре 37 °С в течение 1ч. после
чего содержимое лунок сливают.
9.3.3 В лунки планшета вносят по 0.2 см3 раствора буфера для промывки (см. 8.2.7), оставляют на
1— 2 мин и сливают. Процедуру промывки повторяют еще три раза. Остатки жидкости интенсивно стря
хивают на чистую фильтровальную бумагу.
9.3.4 В лунки планшета вносят по 0.1 см3 раствора ферментного конъюгата (см. 8.2.8). заклеивают
пленкой или закрывают крышкой, инкубируют в термостате при температуре 37 вС 1 ч и отмывают, как
указано в 9.3.3.
9.3.5 В лунки планшета вносят по 0,1 см3 раствора № 11 (см. приложение А) и инкубируют при ком
натной температуре втемноте втечение 15 мин. Добавляют 0,1 см3раствора No 12 (см. приложениеА) и
аккуратно перемешивают легким постукиванием по ребру планшета. Помещают планшет в вертикаль
ный фотометр и измеряют значения ОП при длине волны 450 нм.
Запись результатов проводят согласно приложению В.
10 Обработка результатов измерения
10.1По показателям ОП в лунках-дублях находят среднеарифметические значения. Разность
значений ОП для них в процентах от среднего не должна превышать 10.
Связывание А Т (или относительное поглощение) П. %. рассчитывают по формуле
ОПк
П =
ОП,:
■100,
(
1
)
где ОПп — среднее значение ОП. измеренной в лунках с градуировочными растворами энрофлоксаци-
на К,— К5 (см. 8.2.6) или рабочими растворами экстрактов испытуемых проб;
ОПк— среднее значение ОП. измеренной влунках с градуировочным раствором Kg
(
с
м
.
8.2.6).
По значениям процентовсвязывания, вычисленнымдля градуировочныхрастворов исоответству-
ющим известным значениям массовой концентрации энрофлоксацииа (мкг/дм3). строят градуировоч
ный график в полулогарифмической системе координат.
10.2Для построения градуировочного графика используют масштабно-координатную бумагу. На
ось абсцисс наносят значения логарифмов концентраций энрофлоксацииа в рабочих разведениях гра
дуировочных растворов (см. 8.2.6). По оси ординат откладывают значения процентов связывания, рас
считанные для массовых концентраций по формуле (1), и строят градуировочный график с
использованием линейной зависимости.
’’ Стрип — полоске из восьми лунок.
2’Зил-лок — замок, обеспечивающий герметизацию пакета.
7