ГОСТ 33635— 2015
8.1 Дизайн для регрессионного анализа
8.1.1 Эффективная концентрация (например. Е С 15, ЕСМ ) и диапазон концентраций, в котором
действие испытуемого вещества представляет интерес, должны охватывать концентрации, включен
ные в испытание. В общем, точность и особенно достоверность, при которых устанавливаются эф
фективные концентрации (ЕСХ). повышаются, если эффективная концентрация находится в диапазоне
испытуемых концентраций. Следует избегать экстраполяции значительно ниже самой низкой действу
ющей концентрации или выше самой высокой концентрации. Предварительное испытание проводят в
целях установления диапазона для выбора используемых концентраций (см. 9.1.4.1).
8.1.2 Если устанавливают значение ЕСХ, то испытывают не менее пяти концентраций в трех повторно
стях для каждой концентрации. В любом случае используют достаточное количество испытуемых концен
траций для установления подходящей модели. Концентрации не должны различаться более чем в два
раза (за исключением тех случаев, когда кривая зависимости концентрация — эффект имеет пологий
наклон). Количество повторностей на каждую обработку можно уменьшить, если количество испытуемых
концен траций с различным эффектом является большим. Увеличение количества повторностей или
уменьшение диапазона испытуемых концентраций приводит к сужению доверительных интервалов
испытания. Если определяют выживаемость и рост личинок в течение 10 сут. то необходимы
дополнительные повторности.
8.2 Дизайн для установления NOEC/LOEC
Если необходимо установить NOEC/LOEC. то используют пять испытуемых концентраций не менее
чем в четырех повторностях, и концентрации не должны различаться более чем в два раза. Количество
повторностей должно быть достаточным для обеспечения адекватной статистической мощности для вы
явления разницы в размере 20 % от контроля при 5%-ном уровне значимости (р = 0.05). Для определе
ния скорости развития обычно подходит дисперсионный анализ (ANOVA), такой как критерий Даннетта
и критерий Вильямса [17]-{20]. Для определения показателя вылупления используют критерий Кохрана —
Армитажа. точный критерий Фишера (с поправкой Бонферрони) или критерий Мантеля — Хензеля.
8.3 Определение диапазона продельны х концентраций
Определение диапазона предельных концентраций выполняется (одна испытуемая концентрация
и контроль), если никакие эффекты не были выявлены в предварительном устанавливающем диапазон
испытании. Целью определения диапазона предельных концентраций является проведение испытания
при достаточно высокой концентрации, чтобы ответственные исполнители могли исключить возможные
токсические эффекты вещества и установить предельную концентрацию, появление которой не пред
полагают в реальной ситуации. Рекомендуется концентрация 1000 мг/кг (сухая масса). Используют не
менее шести повторностей на каждую обработку и контроль. Должна быть показана адекватная стати
стическая мощность для выявления разницы в размере 20 % от контроля при 5%-ном уровне значимости
(р = 0.05). Для данных по метрическому эффекту (скорость развития и масса) установление (-критерия
является подходящим статистическим методом, если данные отвечают требованиям данного критерия
(нормальное распределение, однородность дисперсии). Если указанные требования не выполнены, то
используют (-критерий с различными дисперсиями или непараметричосхий критерий, такой как критерий
Вилкоксоиа — Манна — Уитни. Для данных по показателю вылупления подходит точный критерий Фишера.
9Проведение испытания
9.1 Условия испытания
9.1.1 Подготовка системы обогащ енны й осадок — вода
9.1.1.1 Для внесения испытуемого вещества используют процедуру обогащения, описанную в
руководстве О ЭСР 207 «Определение острой токсичности для дождевых червей» (14]. Обогащенные
осадки помещаются в сосуды и добавляют надосадочную воду с получением объемного соотношения
осадок:вода 1:4 (см. 7.1 и 7.4). Высота слоя осадка должна находиться в пределах 1.5-3 см. Для преду
преждения разделения компонентов осадка и ресуспендирования мелких частиц во время добавления
испытуемой воды в водную колонку, осадок покрывают пластиковым диском и воду выливают на него, и
после этого диск сразу же удаляют. Подходят также другие устройства.
9.1.1.2 Испытуемые сосуды покрывают, например, стеклянными пластинками. Если необходимо, то во
время испытания уровень воды доводят до первоначального объема для компенсации потери воды за счет ис
парения. Для предупреждения отложения солей используют дистиллированную или деионизированную воду.
4