ГОСТ 33506—2015
Если яйцо пустое, тогда это означает, что эмбрион не развился или яйцо не было оплодотворено.
Если в яйце имеется развивающийся эмбрион, то хорошо видна темная масса.
При нормальном развитии зародыша на желтке видна хорошо развитая кровеносная система,
а зародыш едва различим, так как он глубоко погружен в желток. При отсталом развитии зародыш
лежит подскорлупой, кровеносная система на желтке развита слабо.
Удаляют неоплодотворенные яйца и яйца с зародышами, погибшими в первые дни инкубации,
а такжес зародышами, погибшими уже после развития кровеносной системы (кровяные кольца).
На девятый день повторно просвечивают яйца, отбраковывают все нежизнеспособные и опять
помещают яйца тупыми концами вверх в инкубатор без вращения, тем самым обеспечиваядоступность
хориоаллантоисной мембраны.
Не допускаются взбалтывание, излишний наклон и любые другие механические раздражения
куриных яиц приих подготовкедля проведения испытаний.
8.5 Проведение испытаний
На десятый день куриное яйцо помещают на подставку для яиц тупым концом вверх. Маркером
отмечают воздушную полость, медицинским пинцетом удаляют отмеченный участок скорлупы,
освобождая от нее воздушную камеру. На поверхность подскорлуповой оболочки наслаивают 400 мм3
физиологического раствора (для предотвращения высыхания). Куриное яйцо помещают обратно в
инкубатор стемпературой (38.5.10,5) °С иотносительной влажностью (62,2 i 7.5) % на 20 миндля снятия
травматического шока.
Последовательно, с интервалом в 3—5 мин. готовят 6 куриных яиц.
Через 20 мин последовательно, соблюдая интервал в 3—5мин. извлекают вскрытые куриные яйца
из инкубатора.
Удаляют пинцетом подскорлуповую оболочку так, чтобы не повредить хориоаллантоисную мем
брану. Если происходит повреждение хориоаллантоисной мембраны или возникают кровотечения, то
эмбрион отбраковывают.
На освобожденную хориоаллантоисную мембрану трех из подготовленных куриных эмбрионов
добавляют испытуемую пробу в дозе 0.05 г (см3), на оставшиеся три добавляют раствор NaCI с массо
вой долей 0.9 % или медицинское вазелиновое масло в том же объеме.
Через 5 мин аккуратно смывают физиологическим раствором испытуемый материал и регистри
руют реакцию хориоаллантоисной мембраны.
8.6 Обработка и оценка результатов
Характеристику выраженности симптомов раздражения хориоаллантоисной мембраны и их
оценку в баллах проводятсогласно таблице 4.
Т а б л и ц а 4 — Оценка симптомов раздражающего действия испытуемого образца на хориоаллантоисную
мембрану куриного эмбриона
Эмбрион (хориоаллактоисиая мембрана)
Оценка
в баллах
Выраженность
раздражающего действия
Отсутствие видимой гиперемии, четкий сосудистый рисунок
0
Отсутствие
1
2
3
Увеличение сети капилляров, сосуды инъецированы (расширены)
Точечные кровоизлияния, отдельные сосуды трудно различить
Крупные кровоизлияния, диффузное глубокое покраснение
Денатурация (денатурация белка внутрисосудистая и внесосудистая)
4
Слабое
Умеренное
Выраженное
Резко выраженное
Индекс раздражающего действия испытуемой продукции на хориоаллантоисную мембрану кури
ного эмбриона
1са
и
в баллах вычисляют поформуле
/сам =
(Ra
-
R
к) + (Яо -
R.)2
+ (
Ro
- Я « )з/3 ,(4)
где
R
— выраженностьэритематозной реакции в баллахнаопытном иконтрольномкуриных эмбрионах;
о — опытный куриный эмбрион;
к — контрольный куриный эмбрион;
1.2.3 — порядковый номер куриного эмбриона;
3 — количество куриных эмбрионов.
Ю