ГОСТ ISO 5553—2013
8Проведение определения
8.1 Приготовление тонкослойных пластин
Растворяют 0,3 г крахмала (см. 5.5) в 90 см3 кипящей воды. Охлаждают, добавляют 15 г порошка
клетчатки (см. 5.4) и гомогенизируют в лабораторном миксере (см. 6.3) в течение 1 мин.
Суспензию наносят на стеклянные пластины (см. 6.1) при помощи прибора для равномерного рас
пределения (см. 6.2), приспособленного для получения слоя толщиной 0,25 мм.
Сушат пластины на воздухе в покое в течение 60 мин при комнатной температуре и нагревают их
окончательно в течение 10 мин при температуре 100 °С.
Хранят пластины в эксикаторе (см. 6.4).
Также возможно использование готовых пластин (см. 6.2).
8.2 Приготовление испытуемой пробы
Гомогенизируют пробу, пропустив ее не менее двух раз через мясорубку (см. 6.5), помешивая.
Хранят пробу в заполненном доверху герметичном закрытом контейнере и по необходимости в холо
дильнике. Анализируют пробу сразу, но не позднее чем в течение 5 ч.
8.3 Приготовление сыворотки
8.3.1 Размачивают 50 г анализируемой пробы (см. 8.2) в 15 см3 воды при температуре от
40 до 60 °С в химическом стакане, используя лопатку или стерженьдля размешивания, в течение 5 (не
более пяти) мин до получения однородной массы.
8.3.2 Добавляют 10 г трихлоруксусной кислоты (см. 5.1) и вновь тщательно размешивают.
8.3.3 Немедленно помещают в холодильник на 1 ч и затем собирают отделившуюся сыворотку,
сливая через гофрированную фильтровальную бумагу (см. 6.6).
8.3.4 Если фильтрат мутный, встряхивают один раз с равным объемом диэтилового эфира (см. 5.2).
Удаляют слой эфира небольшой пипеткой и добавляют равный объем этанола (см. 5.3) к водной фазе.
Встряхивают в течение 1 мин. Отстаивают смесь в течение нескольких минут и фильтруют через гоф
рированную фильтровальную бумагу (см. 6.6).
8.4 Хроматографическое разделение
8.4.1 Наливают проявляющий разбавитель (см. 5.7) в проявляющую емкость (см. 6.8) высотой от
5 до 10 мм и закрывают емкость крышкой. Отстаивают в течение 30 мин при температуре окружающей
среды в защищенном от солнечного света и сквозняка месте.
8.4.2 Наносят 3 мм3 сыворотки или 6 мм3, если выполнялась процедура очистки согласно 8.3.4, на
слой клетчатки (см. 8.1) по линии, проведенной карандашом на расстоянии 2 см от дна. Пятна наносят
небольшие, по 1 мм3.
Для сушки используют теплый поток воздуха от фена (см. 6.9).
П р и м е ч ан и е — Следуетизбегать попадания горячеговоздуха воизбежаниеопасностигидролизафосфатов.
8.4.3 Таким же образом наносят 3 мм3 эталонной смеси (см. 5.6) на пластину на расстоянии
от 1до 1.5 см от места пробы, но точно на таком же расстоянии от дна.
8.4.4 Снимают крышку с емкости и быстро, но осторожно, помещают пластину с клетчаткой в
емкость. Сразу закрывают крышкой. Проявляют пластину при температуре окружающей среды в защи
щенном от солнечного света и сквозняках месте.
8.4.5 Продолжают проявление до момента поднятия верхней части растворителя от линии, про
веденной карандашом, приблизительно на 10 см. Вынимают пластину из емкости и сушат в течение 10
мин в сушильном шкафу (см. 6.11) при 60 °С или в потоке холодного воздуха.
8.5 Выявление фосфатов
8.5.1 Пластину размещают вертикально под вытяжной трубой и равномерно опыляют пластину
реагентом-распылителем (см. 5.8).
Желтые пятна проявляются сразу же.
8.5.2 Пластины сушат в потоке теплого воздуха от фена (см. 6.9). Постепенно нагревают в печи в
течение 1 ч при 100 °С для удаления последних следов азотной кислоты. Удаляют пластину из печи и
проверяют отсутствие резкого запаха азотной кислоты.
3