ГОСТ 33639—2015
8.3.4 После внесения личинок
М. autumnalis.
когда личинки больше не видны на поверхности,
навозпокрывают сухим вермикулитом на высоту примерно 3 см. Вермикулит обеспечивает подходящий
субстратдля окукливания. Для испытаний с S.
stercoraria
добавление вермикулита не требуется.
8.4 Наблюдения
Если вкачестве начальной точки вбиологическом испытании используют яйца (т. е. виспытании с
S.
stercoraria),
то количество вылупившихся яиц оценивают через 48 ч после внесения яиц. Во время
периода вылупления взрослых особей ежедневно регистрируют пол и количество вылупившихся
взрослых особей и последующую выживаемость. Если пол только что вылупившихся мух
определить невозможно, то мух оставляют на 2—3 ч перед повторной идентификацией пола.
Регистрируют все визуальные морфологические аномалии (включая размер тела, отсутствие
вылупления и т. п.). Вылупившихся мух (включая мертвых) удаляют ежедневно. В испытаниях с S.
stercoraria
вылупление взрослых особей начинается примерно через 18 сут после начала
испытания. В испытаниях с
М. autumnalis
вылупление взрослыхособей начинается примерно через
13 сут после начала испытания. Испытание заканчиваютчерез 5сут после вылупления последней
взрослой особи вконтроле.
8.5 Дизайн испытания
8.5.1 Испытание по определению диапазона концентраций: если токсичность испытуемого
вещества не известна, то используют пять номинальных испытуемых концентраций, составляющих
0.1; 1.0; 10; 100 и 1000 мг/кг(сухой массы навоза) плюс необработанный контроль и контроль на раство
ритель (если растворителем является не вода). Если имеется информацияо токсичности, то сее учетом
испытуемые концентрации можно адаптировать (см. 8.5.3). Все испытуемые концентрации выражаются
на основе сухой массы.
8.5.2 Ограничивающее или конечное испытание: если результаты испытания по определению
диапазона концентраций указывают, что неэффективная наблюдаемая концентрация (NOEC) химичес
кого вещества выше, чем испытанные концентрации (например, 1000 мг/кг навоза по сухой массе), то
проводят определениедиапазона предельных концентраций всоответствующей концентрации(обычно
1000 мг/кг сухой массы навоза) вместо конечного испытания. Ограничивающее испытание проводится с
восьмью сосудами с испытуемым химическим веществом и 8 сосудами без обработки. Стандартное
вещество и контроль на растворитель (если растворителем является не вода) также включаются в
испытание (вкаждом случае восемьповторностей).Такойдизайн выбран согласно руководству ОЭСР N9
54 (24].
8.5.3 Если эффекты испытуемого вещества находятся впределах,установленных виспытании по
определениюдиапазонов (с поправкой на гибель вконтроле с использованием формулы Аббота (1925)
[25]).то проводитсяконечное испытание. Конечноеиспытание проводят с определением NOEC илиЕСх:
- для определения NOEC испытывают не менее 5 концентраций в геометрической прогрессии.
Используют четыре повторности для каждой испытуемой концентрации в обработке плюс восемь
контрольных проб. Интервал между концентрациями различается не более чем в 1.8 раза:
- для определения ЕС,, (например. ЕС10, ЕС50) испытывают 12 концентраций. Используют не
менее двух повторностей для каждой испытуемой"концентрации и шесть повторностей в контроле.
Интервал между концентрациями различается не менее 2 в диапазоне предполагаемых эффектов при
низких концентрациях иболее 2 при более высоких иболее низких концентрациях.
Помимо необработанного контроля и контроля на растворитель (если растворителем является
не вода) испытывают стандартное вещество (не всегда, см. 5.1).
8.5.4 Позиционное отклонение устраняется с использованием рандомизированного «полного»
блочного плана для всех проведенных испытаний (испытание по определению диапазона, ограничи
вающее испытание или конечное испытание).
9 Статистическая оценка
9.1В настоящем стандарте не даются определенные указания по статистическому анализу
результатов испытания. Однако,основываясь на недавних рекомендацияхвдругих руководствах ОЭСР
(в основном на руководство по статистике [24]. а также других опубликованных руководствах [26], в
частности [27], можно сделать некоторые предложения. Настоящий стандарт нацелен прежде всего на
определение ЕСж. Согласно недавним руководствам Международного сотрудничества по гармони
зациитехническихтребованийдлярегистрации ветеринарных средств [28] требуется определение ЕСИ
для многих контролирующих организаций (например, в Европейском союзе), в основном с учетом ста
тистических и экологических требований. Однако по причине гибкости руководящих указаний также
приводится определение NOEC по [26]. [27].
5