ГОСТ 33639—2015
Приложение Б
(рекомендуемое)
Культивирование навозных мух
Метод культивирования в лабораторных условиях Musce autumnalls De Geer(Diptera: Muscidae)
В данном документе описывается метод, использованный для культивирования М. autumnalls в исследо
вании Inveresk.
1 Условия содержания и окружающей среды
Культуры помещают в пластиковые камеры (каждый размерами примерно 50 » 50 * 50 см) с расположенным
снаружи нагревательным устройством.
Условиями окружающей среды являются температура (30 : 2) ‘С и относительная влажность более 60 %.
Все периоды развития, приведенные в данном методе, основаны на культивировании при данной температуре
и подлежат повторной оценке при использовании режима с более низкой температурой.
Световой цикл составляет: 16 ч — свет. 8 ч — темнота. В дополнении к люминесцентному освещению
используют источник освещения лампами накаливания (такой как вольфрамовая нить накала) для получения
зоны, в которой мухи могут греться.
2 Кормление
- Вода подается неограниченно в каждую камеру переворачиванием наполненного водой стакана на поднос,
покрытый фильтровальной бумагой;
- сухой яичный порошок, сухое молоко и сахароза (соотношение 1.1:1) даются неограниченно;
- дается вата, пропитанная раствором меда (25 %-ный раствор меда, масса растворенного вещества/объем
раствора), и пропитывается повторно примерно два раза в неделю.
- свежая свиная печень дается раз а неделю в качестве дополнительного источника белка для мух самок
(она предназначается преимущественно для самок, питающихся богатым белками секретом скота). Полоски
печени подвешиваются на крючки на стенках камеры.
3 Кладка яиц
- Навоз отбирают от крупного рогатого скота с описанием проведенных ветеринарных обработок. Крупный
рогатый скот не подвергается обработкам лекарственными препаратами минимум за 8 недель или антигельмин-
тиками в виде болюса минимум за 5 мес до отбора навоза. Навоз замораживают примерно при минус 20 *С после
отбора и хранят при этой температуре до применения. Навоз размораживают при комнатной температуре при
мерно в течение 24 ч перед внесением а культуру;
- в несинхронизированную культуру навоз крупного рогатого скота вносится еженедельно. В синхронизиро
ванную культуру навоз крупного рогатого скота вносится, когда взрослые мухи находятся между 7—10 сут; 3—4 сут
после первого наблюдения копуляции;
- размороженный навоз гомогенизируют с использованием лабораторного гомогенизатора в течение
примерно 10 мин до добавления в культуру. Навоз должен быть достаточно влажным для легкого формирования
шарика диаметром примерно 7 см. но достаточно сухим для сохранения формы шарика. Данный шарик бросают на
пластиковый поднос с получением искусственной лепешки. Затем лепешку помещают в культуру;
- каждую партию навоза с яйцами переносят примерно в 1 кг навоза крупного рогатого скота в пластиковое
ведро. Если плотность яиц является очень высокой, то яйца разделяют для обеспечения не более чем примерно
500 яиц на 1кг каждой партии;
- через 48 ч после кладки яиц наносят слой опилок высотой примерно 3 см на поверхность навоза и ведро
покрывают мелкой сеткой или марлей (подходит пеленка). Личинки будут мигрировать на поверхность навоза и в
опилки для окукливания.
4 Цикл развития и сроки развития
- Яйца откладываются по отдельности и в группах. Яйца преимущественно откладываются на поверхности
навоза и виден только концевой дыхательный усик. Группы яиц удаляют из навоза и осторожно препарируют с
помощью иглы для использования в опыте:
- вылупление яиц происходит примерно через 24— 36 ч. Если требуются личинки, то их извлекают из навоза
примерно через 48 ч после кладки яиц;
- имеется три стадии развития личинок, личинки третьего возраста представляют собой личинки цилиндри
ческой формы желтовато-белого цвета, которые сужаются к передней части, и их длина составляет примерно 12
мм. Обычно личинки начинают двигаться примерно на 4-е сутки после вылупления яиц. мигрируя на поверхность навоза и
в слой опилок для окукливания;
8