ГОСТ 33639—2015
тельная влажность (RH) должна быть более 60 % в первой фазе испытания для предупреждения
высыхания яиц. Поддерживается световой цикл: 16 ч свет и 8 ч темнота: освещение обеспечивается
люминесцентными лампами. В начале испытания регистрируется интенсивность света в зоне нахожде
ния испытуемых сосудов примерно на уровне поверхности навоза.
8Проведение испытания
8.1 Подготовка навоза
8.1.1 Навоз извлекают из морозильной камеры на время полной разморозки перед использова
нием (только отобранный из прямой кишки навозиспользуют сразу же. см. 7.2.2). Навоз гомогенизируют
примерно в течение 10 мин. например, в высокопроизводительном лабораторном смесителе перед
подготовкой отдельных групп обработок. Обычно не требуется изменение влажности (опыт показал,
что для мух подходит содержание влаги 80 % исходногоуровня воды).
8.1.2 В начале испытания определяют содержание влаги и pH пробы навоза от крупного рогатого
скота, который не обрабатывали лекарственными препаратами минимум за 8 недель или антигельмин-
тиками в форме болюса минимум за 5 мес перед сбором навоза. Навоз должен быть достаточно
влажным для легкого формирования шарика диаметром примерно 7 см. но достаточно сухим для
сохранения формы шарика. Определяют содержание азота и углерода (включая соотношение C/N).
Регистрируют методы определения этих показателей. Возможные методы определения показателей
описаны вприложении А.
8.2 Применение испытуемых веществ
8.2.1 Все испытуемые концентрации выражаются на основе сухой массы для гарантии сравни
мости результатов отдельных опытов.
8.2.2 Известное количество навоза помещают в высокопроизводительном лабораторном сме
сителе. Испытуемое и стандартное вещества вносят в известном количестве воды. Если химические
вещества слаборастворимы вводе, то их вносят визвестном количестве(в зависимостиотрастворимос
ти испытуемого вещества подходит 1—10 мл/на 120 гсухой массы навоза) органического летучего рас
творителя (например, ацетона или этанола) и тщательно перемешивают в течение примерно 10 мин. В
контрольныйнавозвносятизвестное количестворастворителя (только контрольнарастворитель) или
соответствующее количество только воды (необработанный контроль). После этого навоз и соответ
ствующее добавленное вещество тщательно перемешивают. При использовании растворителя в
качестве носителя — его полностью выпаривают в течение не менее 4 ч при комнатной температуре
перед внесением тестовыхорганизмов.
8.2.3 Концентрации внесенных веществ подтверждают соответствующими аналитическими
методами. Для растворимых веществ подтверждение всех испытуемых концентраций проводят ана
лизом раствора с наиболее высокой концентрацией, использованной для испытания, с документиро
ванием последующего разведения и использованием калиброванного оборудования для внесения
(например, калиброванной аналитической стеклянной посуды, калиброванного распылительного
оборудования для внесения).
8.3 Подготовка испытуемых сосудов и внесение организмов
8.3.1 100 г навоза (сырой массы) вносят в каждый испытуемый сосуд с получением высоты слоя
навоза в сосудах 5—8 см. В качестве начальной точки биологического испытания используют яйца (S.
stercoraria)
и личинки (
М
.
autumnalis).
которые получают описанными видоспецифичными методами
культивирования.
8.3.2 Испытанияс S.
stercoraria
начинают с яиц. вто время какиспытания с
М. autumnalis
с личинок
в основном с практической точки зрения. Отложенные яйца/личинки разделяют на отдельные группы
соответственно количеству обработок перед внесением. Такая процедура обеспечивает перенос
организмов в конкретный тип навоза без какого-либо перекрестного загрязнения химическими
веществами. Распределение яиц/личиноквопытные группыобработокпроводят постепеннонебольши
ми партиями для дальнейшей рандомизации распределения личинок. Каждую группу яиц хранят на
влажнойфильтровальной бумагевзакрытом контейнередо использования вбиологическом испытании.
8.3.3 10 яиц S.
stercoraria
и 10 личинок
М. autumnalis
помещают на поверхность навоза в каждом
испытуемом сосуде. Если используются яйца, то их помещают на кусочек влажной фильтровальной
бумаги на поверхность навоза для оценки вылупления яиц (критерия достоверности). Сразу же после
вылулления личинки S.
stercoraria
покидают кусочек фильтровальной бумаги, подвергаясь, таким
образом, воздействию навозом.
4