ГОСТ 33637—2015
действия могут быть занесены коконы, что также будет оказывать влияние на значения BAF. Рекомен
дуется взвесить подвыборку тестовых червей до проведения испытания для оценки среднего сырой и
сухой массы.
7.1.3 Должно использоваться высокое соотношение почва—червь для сведения к минимуму сни
жения концентрации испытуемого вещества в почве во время фазы поглощения. Для Eisenia fetida и
Eisenia andrei рекомендуется использовать минимальное количество 50 г сухой почвы на одного червя, а
для энхитреид — как минимум 10—20 г сухой почвы на испытуемый сосуд. Сосуды должны содержать
слой почвы высотой 2—3 см (энхитреиды) или 4— 5 см (земляные черви).
7.1.4 Черви, используемые в испытании, отбираются из культуры (например, энхитреиды с по
мощью ювелирного пинцета). Половозрелых особей переносят в необработанную испытуемую почву
для акклиматизации и дают корм (см. 7.2.1). Если условия испытаний отличаются от условий культи
вирования, то 24—72 ч достаточно для фазы акклиматизации в целях адаптации червей к условиям
испытаний. После акклиматизации земляных червей промывают переносом в стеклянную посуду (на
пример. чашки Петри), содержащую чистую воду, а затем взвешивают перед внесением в испытуемую
почву. Перед взвешиванием избыток воды удаляют с червей, осторожно прикасая их к краю посуды или
осторожно промокая их досуха с помощью слегка смоченной бумажной салфетки.
7.1.5 Наблюдают и регистрируют роющее поведение тестовых организмов. В испытаниях с зем
ляными червями особи (в контроле и опыте) обычно зарываются в почву в течение нескольких часов;
такое поведение червей проверяют не позднее 24 ч после внесения червей в испытуемые сосуды. Если
земляные черви не могут зарываться в почву (например, более чем 10 % за более чем половины фазы
поглощения), то это означает, что условия испытаний являются неподходящими или тестовые организ мы
имеют патологические отклонения. В таком случае испытание останавливают и повторяют вновь.
Энхитреиды в основном обитают в интерстициальных порах почвы, и часто их кожный покров только
частично контактирует с окружающим субстратом; воздействие на роющих и не роющих энхитреид счи
тается равнозначным, и для энхитреид без признаков роения не требуется обязательного повторения
испытания.
7.2 Кормленио
Кормление проводят, когда используется почва с низким общим содержанием органического угле
рода. При использовании искусственной почвы для земляных червей рекомендуется еженедельная
норма кормления (т. е. червей следует кормить один раз в неделю) из расчета 7мг сухого навоза на г
сухой массы почвы, а для энхитреид еженедельная норма составляет 2—2,5 мг хлопьев овсяной крупы
на г сухой массы почвы [21]. В первом случав корм смешивают с почвой непосредственно перед до
бавлением тестовых организмов. Предпочтительно использовать такой же тип корма, что и в культуре
(см. приложение Г)-
7.3 Освещение и температура
Испытания проводят при контролируемом цикле свет/темнота 16/8 ч. предпочтительно от 400 до
800 лк в области испытуемых сосудов [3]. Температура в испытании должна составлять (20 ± 2) °С в
течение всего периода.
7.4 Испытуемые концентрации
Используется одна концентрация. Ситуации, в которых необходима(ы) дополнительная(ые)
концентрация(и). должны быть обоснованы. Если токсичность (ЕСХ) испытуемого вещества близка к
пределу аналитического определения испытуемого вещества, то рекомендуется использовать мечен
ное радиоактивной меткой испытуемое вещество с высокой удельной радиоактивностью. Для метал
лов концентрация должна быть выше фонового уровня в тканях и почве.
7.5 Повторности
7.5.1 Для кинетических измерений (фазы поглощения и элиминации) минимальное число повтор
ностей обработанных камер должно составлять три на каждую точку отбора проб. Общее количество
подготовленных повторностей должно быть достаточным, чтобы охватить все время отбора проб в
течение фазы поглощения и элиминации.
7.5.2 Для биологических наблюдений и измерений (например, соотношение сухая/сырая масса,
содержание липидов) и для анализа фоновых концентраций в червях и почве должно быть не менее 12
7