ГОСТ 33637—2015
и должен использоваться растворитель из партии, примененной для изготовления стокового раствора.
Токсичность и летучесть растворителя и растворимость испытуемого вещества в выбранном раство
рителе должны быть основными критериями для выбора подходящего солюбилизирующего агента.
6.4.2 Для веществ, плохо растворимых в воде и в органических растворителях. 2.0—2.5 г тон
ко измельченного кварцевого песка в испытуемом сосуде смешивают с количеством испытуемого ве
щества. например с помощью ступки и пестика, для получения требуемой испытуемой концентрации.
Эту смесь кварцевого леска и испытуемого вещества добавляют к предварительно увлажненной почве
и все тщательно перемешивают с соответствующим количеством деионизированной воды для полу
чения требуемого содержания влаги. Конечную смесь распределяют по испытательным сосудам. Про
цедуру повторяют для каждой испытуемой концентрации и соответствующих коитролей с получением
также 2,0—2.5 г тонко измельченного кварцевого песка на испытательный сосуд.
6.4.3 Концентрацию испытуемого вещества в почве определяют после его внесения. Перед вне
сением тестовых организмов проверяют однородность распределения испытуемого вещества в почве.
Следует указывать метод, используемый для внесения тестовых организмов, и причины выбора опре
деленной процедуры внесения [45].
6.4.4 Равновесие между почвой и фазой поровой воды в идеале должно быть установлено перед
внесением тестовых организмов: рекомендуемым периодом времени являются 4 сут при температуре
20°С. Для многих органических веществ, плохо растворимых в воде, время, необходимое для достиже
ния истинного равновесия между адсорбированными и растворенными фракциями, может исчисляться в
сутках или месяцах в зависимости от цели исследования. Например, когда имитируются условия
окружающей среды, то внесенная почва может быть «состаренной» в течение более длительного пери
ода; например, для металлов такой период составляет три недели при температуре 20 “С [46].
6.5 Культивирование тестовых организмов
6.5.1 Черви предпочтительно должны поддерживаться в постоянной лабораторной культуре. Руко
водство по методам лабораторного культивирования видов Eisenia fetida, и Eisenia andrei, и Enchytraeid
приведено в приложении Г. [36]. [33], [34].
6.5.2 У червей, используемых в испытании, не должно наблюдаться заболеваний, аномалий и
паразитов.
7 Проведение испытания
Тестовые организмы подвергаются воздействию испытуемым веществом в течение фазы погло
щения. Фаза поглощения должна составлять 14 сут (для энхитреид) или 21 сут (для земляных червей),
если было показано, что достигнуто равновесное состояние.
Для фазы элиминации червей переносят в почву без испытуемого вещества. Первую пробу от
бирают на 4—24 ч после начала фазы элиминации. Примеры графиков отбора проб для 21-суточной
фазы поглощения и 21-суточной фазы элиминации приведены в приложении Б.
7.1 Тестовые организмы
7.1.1 Многие виды земляных энхитреид имеют очень низкую индивидуальную массу (например,
5—10 мг сырой массы для одной особи Enchytraeus albidus и менее для Enchytraeus crypticus или
Enchytraeus luxuriosus); для выполнения измерений массы и химического анализа может потребоваться
объединение червей из повторностей испытуемых сосудов (т.е. всех червей из параллельных сосудов
используют для проведения одного анализа тканей). 20 отдельных энхитреид вносят в каждую повтор
ность и используют не менее трех повторностей. Если предел анализа испытуемого вещества высокий,
то может потребоваться больше червей. Для тестовых видов с более высокой индивидуальной
массой (Eisenia fetida и Eisenia andrei) используют параллельные сосуды, содержащие одну особь.
7.1.2 Земляные черви, используемые в испытании, должны иметь сравнимую массу (например,
Eisenia fetida и Eisenia andrei должны иметь индивидуальную массу в пределах 250—600 мг). Энхитре-
иды (например, Enchytraeus albidus) должны иметь длину приблизительно 1 см. Все черви, используе
мые в конкретном испытании, должны поставляться из одного источника, а половозрелые особи долж ны
иметь клителлюм (см. приложение Г). Поскольку масса и возраст червей могут оказывать влияние на
значения BAF (например, из-за разного содержания липидов и/или наличия яиц), то эти параметры
следует четко регистрировать и учитывать при интерпретации результатов. Кроме того, в период воз-
6