ГОСТ 33600—2015
6.6 Приготовление раствора лактоферрина массовой концентрации 0,25 мг/см3
В стакан вместимостью 25 см3отмеряют 1 см3 раствора лактоферрина массовой концентрации
0.5 мг/см13, приливают 1см3бидистиллированной воды и аккуратно перемешивают.
6.7 Приготовление раствора лактоферрина массовой концентрации 0,1 мг/см3
В стакан вместимостью 25 см3отмеряют 0.1 см3 раствора лактоферрина массовой концентра
ции 1 мг/см3. приливают 0.9 см3бидистиллированной воды и аккуратно перемешивают.
6.8 Построение градуировочной зависимости
Построение градуировочной зависимости и проверку приемлемости градуировки проводят в со
ответствии с руководством пользователя программного обеспечения, прилагаемого к хроматографу, с
использованием растворов лактоферрина по 6.4—6.7.
Градуировку проводят при изменении условий хроматографического анализа, при несоответ
ствии результатов метрологическим требованиям.
Проверку градуировки проводят непосредственно после выполнения градуировки, а в даль
нейшем — периодически, перед каждой серией измерений.
6.9 Подготовка хроматографа к работе
Подготовку хроматографа к работе проводят в соответствии с прилагаемой к хроматографу ин
струкцией.
6.9.1 Условия хроматографирования
Градиентный режим разделения:
подвижная фаза: элюент
А
— элюент В.
Элюент А: с 35 % до 60 % за 30 мин,
с 60 % до 90 % за 5 мин,
с 90 % до 35 % за 5 мин:
- длина волны детектора — 205 нм;
- чувствительность детектора — 0.08 единицы оптической плотности по шкале (ориенти
ровочное значение);
- скорость потока подвижной фазы — 1.2 см3/мин;
- температура (20
±
2) °С.
7 Условия проведения измерений
При выполнении измерений в лаборатории необходимо соблюдать следующие условия:
- температура окружающего воздуха..................от 20 °С до 25 °С;
-относительная влажность воздуха...................от 40 % до 80 %;
•атмосферное давление........................................от 84 до 106 кПа;
• напряжение в электросети ..................................(220
±
10) В;
- частота тока в электросети.................................от 49 до 51 Гц.
8 Проведение измерений
После выхода системы в режим равновесия в хроматограф вводят 20 мкл экстракта (6.2) и де
тектируют с помощью спектрофотометрического детектора при длине волны 205 нм. Приблизитель
ное время удерживания лактоферрина 18—20 мин.
9 Обработка результатов измерений
9.1Массовую концентрацию лактоферрина X, мг/см3, в жидких продуктах определяют по граду
ировочному графику.
4