ГОСТ 33600—2015
5 Отбор проб и подготовка их к анализу
Отбор проб и подготовка их к анализу — по ГОСТ 26809.1 и другим нормативным документам,
действующим на территории государств, принявших стандарт.
В случае если определение не может быть проведено сразу после отбора проб, их хранят в хо
лодильнике при температуре (4
±
2) °С не более 48 ч.
6 Подготовка к проведению измерений
6.1Приготовлениерастворасолянойкислотымолярнойконцентрации
с (HCI) = 1 моль/дм3
Раствор готовят в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1 (раздел 2).
Срок хранения раствора при температуре (20 ♦ 5) °С— не более 1 мос.
6.2 Подготовка пробы исследуемого продукта
6.2.1 Пробы жидких продуктов массой (20,000
±
0,001) г помещают в центрифужную пробирку и
центрифугируют при скорости вращения 5000 мин*1в течение (15—30) мин. При этом она разделяет ся
на два слоя: верхний - жировой и нижний — белковый.
Для осаждения казеина полученную белковую фракцию переливают в мерный цилиндр вме
стимостью 50 см3, помещают в него электроды pH-метра и по каплям добавляют раствор HCI моляр ной
концентрацией 1 моль/дм3 до pH 4.6 ед. pH. Переливают полученный раствор в градуированные
центрифужные пробирки и центрифугируют 15 мин при скорости вращения 5000 мин*1, фиксируют
конечный объем раствора.
Проводят два параллельных определения.
6.2.2 Пробы пастообразных, сухих продуктов массой (5,000
±
0.001) г растворяют в 50
cmj
ди
стиллированной воды, помещают туда электроды и по каплям добавляют раствор HCI молярной кон
центрации 1 моль/дм3до pH 4.6 ед. pH. После достижения указанного значения раствор переносят в
мерную колбу вместимостью 100 см3и доводят до метки дистиллированной водой. Дают отстояться в
течение 30 мин. Затем фильтруют через складчатый фильтр. В случае недостаточного осаждения
казеина проводят центрифугирование фильтрата: переливают полученный фильтрат в центрифуж ные
пробирки и центрифугируют 5 мин при скорости вращения 5000 мин*1.
Полученный экстракт используют для измерений.
6.3 Приготовление подвижной фазы для жидкостной хроматографии (элюенты А, В)
Для приготовления элюента А к ацетонитрилу добавляют 0.1 % ТФУ по объему.
Для приготовления элюента В к бидистиллированной воде добавляют 0,1 % ТФУ по объему.
Полученные элюенты рекомендуется профильтровать через мембранный фильтр. Перед ис
пользованием подвижную фазу дегазируют в круглодонной колбе под вакуумом на ультразвуковой
бане.
Срок хранения элюента А в плотно укупоренной темной посуде при температуре (4
±
2) вС — не
более 3 мес.
Элюент В используется свежеприготовленным.
6.4 Приготовление раствора лактоферрина массовой концентрации 1 мг/см3
Взвешивают (0,025
±
0,001) г лактоферрина. количественно переносят в мерную колбу вмести
мостью 25 см3, доводят до метки бидистиллированной водой и аккуратно перемешивают.
Срок хранения раствора при температуре (4
±
2) °С — не более 1 мес.
6.5 Приготовление раствора лактоферрина массовой концентрации 0,5 мг/см3
В стакан вместимостью 25 см3отмеряют 1 см3раствора лактоферрина массовой концентрации
1мг/см3, приливают 1 см3бидистиллированной воды и аккуратно перемешивают.
3