ГОСТ EN 12916—2012
ют внутри термостата. Температура устройства для инжектирования и раствора образца должна быть
одинаковой, обычно это температура окружающей среды.
П р и м е ч а н и е — Для обеспечения нормальной работы жидкостного хроматографа и его составляющих
за ними необходим регулярный уход. Утечки или частичное засорение фильтров, фритты, инжекторных игл и венти
лей может изменить расход раствора из инжектора и ухудшить показатели прецизионности.
8.2 Устанавливают постоянную скорость потока жидкой фазы в пределах от 0,8 до 1,2 см3/мин и
убеждаются втом, что кювета сравнения рефрактометра заполнена подвижной фазой (см. примечание).
Температуру стабилизируют с помощью устройства для регулирования температуры.
П р и м е ч а н и е — Для сведения дрейфа нуля прибора к минимуму необходимо убедиться в том, что кюве
та сравнения рефрактометра заполняется подвижной фазой, обеспечивая ее прохождение через кювету непосре
дственно перед анализом. Затем кювету сравнения следует перекрыть во избежание потерь за счет испарения или
постоянно пропускать через нее подвижную фазу для компенсации потерь вследствие испарения. Рекомендуется
установить оптимальный расход для того, чтобы свести к минимуму искажения вследствие высыхания, колебаний
температуры или перепада давления в кювете сравнения; фактически это достигается путем обеспечения циркуля
ции подвижной фазы через кювету сравнения с расходом, составляющим одну десятую от расхода, проходящего
через измерительную кювету.
8.3 Для приготовления стандартного раствора 1для калибровки системы (СКС1) в мерную колбу
вместимостью 100 см3 помещают с точностью + 0,0001 г (1,0 + 0,1) г циклогексана (5.1); (0,1 + 0,01) г
1-фенилдодекана (5.3); (0,5 + 0,05) г 1,2-диметилбензола (5.4); (0,1 +0,01) г гексаметилбензола (5.5); (0,1
± 0,01) г нафталина (5.6); (0,05 ± 0,005) г дибензотиофена (5.9) и (0,05 ± 0,005) г 9-метилантраце-на
(5.10). Помещают колбу с ее содержимым вультразвуковую ванну и выдерживают до тех пор, пока ви
зуально не станет видно, что все компоненты растворились в смеси 1,2-диметилбензола/циклогексана.
Удаляют колбу с раствором из ультразвуковой ванны и доводят до метки гептаном.
П р и м е ч а н и е — На холоде (например, в холодильнике) в защищенном от света месте и тщательно гер
метизированной емкости СКС1 может храниться не менее года.
8.4 Для приготовления стандартного раствора 2 для калибровки системы (СКС2) в мерную
колбу вместимостью 100 см3 помещают с точностью до 0,0001 г (0,4 ±0,1) г FAME (5.12) и
(0,04 ± 0,01) гхризена (5.11) и доводят до метки гептаном (5.2). Выдерживают раствор вультразву-
ковой ванне при температуре 35 °С до тех пор, пока визуально раствор не будет гомогенным, без
отложений хризена на дне.
П р и м е ч а н и я
1 Было установлено, что 25 мин — время, достаточное для растворения всех компонентов.
2 На холоде (например, в холодильнике) в защищенном от света месте и тщательно герметизированной ем
кости СКС2 может храниться не менее года.
8.5 Когда условия работы стабилизируются, о чем можно судить по ровной горизонтальной базо
вой линии, инжектируют 10 мкп СКС1 (8.3). Убеждаются, что дрейф базовой линии в течение одного
ВЭЖХ-анализа не превышает 1 % высоты пика циклогексана.
П р и м е ч а н и е — Дрейф базовой линии, превышающий 1%, указывает на присутствие неполадок регули
рования температуры всистеме колонки и рефрактометра и/или на элюирование какого-либо вещества из колонки.
8.6 Убеждаются в том, что все компоненты СКС1 элюируют в следующем порядке: циклогек
сан, фенилдодекан, 1,2-диметилбензол, гексаметилбензол, нафталин, дибензотиофен и 9-метилан-
трацен.
8.7 Убеждаются в том, что составляющие СКС1 четко разделены (рисунок 2).
8.8 Измеряют значения времени удерживания пиков циклогексана, фенилдодекана, 1,2-диме
тилбензола, гексаметилбензола, дибензотиофена и 9-метилантрацена, используя систему сбора
данных.
8.9 Убеждаются в том, что разрешающая способность между циклогексаном и 1,2-диметилбензо-
лом находится в пределах 5,7—10 (11.2).
8.10 Рассчитывают отрезки времени с использованием формул, приведенных в 11.3.
8.11 Следят за тем, чтобы раствор СКС2 был гомогенным (8.4), затем вводят 10 мкл СКС2 и прове
ряют, как элюирует пик хризена — перед первым пиком FAME или вместе с ним.
Обеспечивают, чтобы время удерживания пика хризена было больше времени удерживания пика
9-метилантрацена.
5