ГОСТ 32376—2013
М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы ЙС Т А Н Д А Р Т
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЯ ПО ВОЗДЕЙСТВИЮ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ НА ОРГАНИЗМ
ЧЕЛОВЕКА
Метод оценки обратных мутаций на бактериях
Testing of chemicals of human health
Bacterial reverse mutation test
Дата введения — 2014—08—01
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает порядок проведения испытания химических веществ в тесте
оценки обратных мутаций на бактериях с применением прокариотных клеток, которые отличаются от
клеток млекопитающих такими особенностями, как поступление, метаболизм, структура хромосомы и
процессы репарации ДНК. Тестирования in vitro, как правило, требуют использование экзогенных
источников метаболической активации. Системы метаболической активации in vitro не могут
полностью имитировать условия метаболизма у млекопитающих in vivo. Таким образом, метод не
дает прямой информации по мутагенному и канцерогенному потенциалу химического вещества в
отношении млекопитающих.
Методы оценки обратных мутаций на бактериях обычно используются на начальном этапе
скрининга генотоксической активности, в особенности индукции точковых мутаций. Имеющиеся
многочисленные данные свидетельствуют о том, что большинство химических веществ, которые
выявили мутагенный эффект в данном тесте, показывают мутагенную активность в других тестах.
Имеются примеры мутагенных соединений, которые не были выявлены в данном тесте. Причина
этого явления может быть объяснена специфической природой определяемого события, различиями в
метаболической активации и биодоступности. С другой стороны, факторы, которые повышают
чувствительность метода оценки обратных мутаций у бактерий могут привести к переоценке
мутагенного потенциала тестируемого соединения.
Метод оценки обратных мутаций у бактерий может не подходить для оценки определенных
классов химических веществ, например, веществ с сильной бактерицидной активностью {некоторые
антибиотики) или веществ, которые специфически воздействуют на систему репликации в клетках
млекопитающих (ряд ингибиторов топоизомераз и ряд аналогов нуклеозидов). В таких случаях более
адекватны тесты оценки мутагенности на млекопитающих.
Хотя многие соединения, которые показали мутагенный эффект в данном тесте являются
канцерогенами для млекопитающих, корреляция между двумя видами эффектов не абсолютна. Это
связано с классом химического вещества. Имеются канцерогены, которые не выявляются в данном
тесте, поскольку они действуют через другие негенотоксические механизмы или эти механизмы
отсутствуют в бактериальных клетках.
2 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
2.1 метод оценки обратных мутаций у бактерий (Salmonella typhimurium и Escherichia coli)
(A reverse mutation test): Испытание, направленное на выявление мутации у штаммов бактерий,
зависимых от аминокислот (гистидин или триптофан, соответственно) к штаммам бактерий не
зависимых от наличия этих аминокислот в среде.
2.2 мутагены, вызывающие сдвиг рамки (Framoshift mutagens): Соединения, которые
приводят к вставке или делеции одной или более пар оснований ДНК. в результате чего меняется
рамка считывания РНК.
2.3 мутагены, приводящие к замене пары основания (Base pair substitution mutagens):
Соединения, которые приводят к замене пар оснований ДНК. В тесте оценки обратных мутаций это
изменение может быть в сайте исходной мутации или в другом сайте бактериального генома.
Издание официальное
1