ГОСТ 32916—2014
Кюветы кварцевые длиной оптического пути 10 мм.
Фильтры мембранные с размером диаметра пор не более 0.5 мкм.
Микрошприцдля ВЭЖХ вместимостью 0,100 см3.
Колбы мерные 2-100-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки 1(2,3>-1(2)-1-1(5.10,25) по ГОСТ 29227.
Пробирки мерные с притертыми пробками П-2-5-0,1; П-2-10-0.2; П-2-20-0,2 ХС по ГОСТ 1770.
Цилиндры 1-25-2 по ГОСТ 1770.
Колбы К-1-100-29/32. К-1-250-29/32. К-1-500-29/32 ТС по ГОСТ 25336.
Стаканы В-1-100, В-1-250 ТХС по ГОСТ 25336.
Воронки В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.
Холодильник ХШ-1 -300-29/32 ХС по ГОСТ 25336.
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, х. ч.. с содержанием основного вещества не менее
99.98 %.
Калия гидроокись по ГОСТ 24363, х. ч., раствор молярной концентрации 5 моль/дм3.
Кислотааскорбиновая, фармакопейная.
Спирт изопропиловыйабсолютированный массовой долей основного вещества неменее 99,5 % по
ГОСТ 9805.
Спирт этиловый абсолютированный массовой долей основного вещества не менее 99,9 % по нор
мативным итехническим документам,действующим натерритории государств, принявших стандарт.
Спирт этиловый ректификованный массовой долей основного вещества не менее 96 % по
ГОСТ 18300.
Холекальциферол (витамин D3)массовой долей основного вещества не менее 98 %.
Водадистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применениедругихсредств измерения, вспомогательногооборудования, неуступаю
щих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необхо
димую точность измерения, а также реактивов по качеству нехуже вышеуказанных.
6 Отбор проб
6.1 Отбор проб — по ГОСТ 26809.
6.2 Вслучае, если определение не может быть проведеносразу после отбора проб, то пробы хра
нят вхолодильнике при температуре (4 ± 2) °С не более суток.
7 Подготовка к проведению измерений
7.1 Приготовление исходного раствора витамина Dj
В мерную колбу вместимостью 100 см3помещают (100 » 1) мг витамина D3, растворяют в неболь
шом количестве этилового ректификованного спирта. Объем раствора доводят этиловым ректифико
ванным спиртом до метки.
Раствор хранят не более 1 мес при температуре (4 ± 2) ‘О вбутыли из темного стекла.
7.2 Приготовление рабочих растворов витамина D3
7.2.11 см3исходного раствора витамина D3, приготовленного по 7.1. переносят в мерную колбу
вместимостью 100 см3, растворяют в небольшом количестве этилового ректификованного спирта.
Объем раствора доводят этиловым ректификованным спиртом до метки.
Раствор готовят непосредственно перед проведением анализа. Массовая концентрация рабочего
раствора составляет 10 мкг/см3.
Измерение оптической плотности стандартного раствора витамина 0 3проводят вкварцевой кюве
тестолщиной поглощающегослоя 10мм при 265 нм, используя вкачестве раствора сравненияэтиловый
ректификованный спирт. Массовую концентрацию раствора витамина D3(Ср . мкг/см3) рассчитывают,
используя уравнение
О>3= А265 Ю6/100-485.(1)
где А265— оптическая плотность рабочего раствора витамина D3при 265 нм;
10е — коэффициент пересчета граммов в микрограммы;
100 — коэффициент пересчета на 1 см3;
485 — оптическая плотность спиртового раствора витамина D3 массовой концентрации 1 г в
100 см3(10 мг/мл) этиловогоспирта при 265 нм итолщине поглощающего слоя 10 мм.
3