ГОСТ 31343—2007
Приложение И
(рекомендуемое)
Метод гельминтологического исследования жидкого навоза
Яйца гельминтов выделяют изжидкости путем коагулирования споследующим отделением от осадка раство
ром 3 %-ной соляной кислоты и насыщенным раствором азотнокислого калия.
В качестве коагулянта используют 0,12 %-ный раствор сернокислой меди.
Проведение анализа
В стеклянный цилиндр вместимостью 1500 см3наливают 1000 см3 исследуемой пробы и добавляют 0,6 г сер
нокислой меди. Жидкость тщательно размешивают и дают отстояться в течение 60 мин, после чего надосадочную
жидкость сливают, а остаток переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют в течение 3 мин при частоте
вращения 66.6 об/мин. Жидкость сливают, а к осадку добавляют 4 см3 3 %-ного раствора соляной кислоты и тща
тельно перемешивают до получения гомогенной массы. Смесь повторно центрифугируют, надосадочную жидкость
сливают, а к осадку добавляют насыщенный раствор азотнокислого калия (« = 1,39). размешивают стеклянной
лапочкой и центрифугируют в течение 3 мин при частоте вращения 10—13.3 с"1.
После центрифугирования пробирки с осадком ставят в штатив, заливают раствором азотнокислого калия до
образования выпуклого мениска и накрывают покровными стеклами, предварительно обезжиренными смесью
спирта с эфиром (1:2). Отстаивают в течение 25 мин.
Затем снимают предметные стекла и просматривают их под микроскопом.
Количество яиц выражают в единицах на 1 дм3 жидкости.
Выживаемость яиц гельминтов определяют следующим образом.
Предметные стекла с прикрепленными к ним яйцами гельминтов помещают во влажные камеры (чашки Пет
ри) с фильтровальной бумагой, постоянно увлажненной жидкостью Барбагалло и ставят в термостат при темпера
туре 27 аС —30 °С. Наблюдения ведут в течение 1-го месяца, просматривая препараты под микроскопом.
Под большим увеличением микроскопа (600 крат) выявляют резко выраженные признаки гибели яиц:
деформацию оболочек, вакуолизацию плазмы зародыша, прогибания оболочки внутрь, разрушение, смещение
плазмы зароды ша к одному полюсу.
Помимо световой микроскопии можно применять метод окрашивания. Применяют метиленовый синий кра
ситель (метиленового синего 0.05 г. едкого натрия — 0.5 г. молочной кислоты — 15 см3). Зародыши погибших яиц
аскарид окрашиваются в синий цвет, а жизнеспособные окраску не воспринимают.
Определение содержания яиц гельминтов в твердой фракции навоза проводят с помощью метода, который
заключается в следующем: 25 гтвердой фракции навоза вносят в центрифужную пробирку вместимостью 125 см3,
доливают 75 см3водопроводной воды. Смесь перемешивают до образования гомогенной массы.
Всплывшие частицы сразу же удаляют. Затем смесь центрифугируют в течение 3 мин при частоте вращения
600—800 с-1, после чего воду сливают, а к осадку добавляют 75 см3 насыщенного раствора соли азотнокислого
натрия (NaN03) (« = 1.39). тщательно перемешивают и повторно центрифугируют в течение 3 мин.
После центрифугирования пробирки со смесью ставят в штатив и осторожно добавляют раствор насыщенно
го азотнокислого натрия до образования выпуклого мениска. Затем пробирки закрывают предметными стеклами и
ставят на 30 мин. В течение этого времени яйца гельминтов всплывают и прикрепляются к нижней поверхности сте
кол. Через 30 мин стекла снимают, а на их месте помещают другие на такое же время.
На снятые стекла наносят несколько капель 50 %-ного глицерина, накрывают покровными стеклами, просмат
ривают под микроскопом при малом увеличении. Тоже самое повторяют и со второй партией стекол. Таким образом
выявляют до 42 %—48 % всех присутствующих в образцах яиц гельминтов.
Приложение К
(рекомендуемое)
Методы определения наличия семян сорняков и их выживаемость в навозе
К.1 Метод определения наличия семян сорняков
К.1.1 Из средней смешанной пробы отбирают навеску объемом 200 см3 и переносят в комплект сит с размера
ми 3; 1: 0.5. 0.25 мм, последовательно вставленных одно в другое, и проводят отмывку в воде, которую по мере
загрязнения меняют. По окончании отмывки твердые частицы,оставшиеся на ситах, переносят на плотную бумагу и
сушат до воздушно-сухого состояния.
25