ГОСТ РИСО 13720—2011
4 Сущность метода
Метод основан на высеве определенного количества исходной суспензии, ее десятикратных раз-
ведений на CFC агар и в последующем подсчете количества презумптивных Pseudomonas spp.
Посевы инкубируют при температуре 25 °С в течение (44 ± 4) ч.
Наличие на агаре колоний презумптивных Pseudomonas spp. подтверждается тестом на оксидазу
(оксидаэоположительиые).
Количество презумптивных Pseudomonas spp. в 1 г (см3) исследуемой пробы рассчитывается ис
ходя из количества подтвержденных колоний на чашке с CFC агаром.
5 Приготовление разведений, питательных сред и реактивов
5.1 Общие требования
Общие правила проведения лабораторных исследований должны удовлетворять требованиям
ИСО 7218; подготовка и тестирование питательных сред — ИСО 11133-1 и ИСО 11133-2.
5.2 Приготовление разводений
Десятикратные разведения готовят в соответствии с ИСО 6887-1 и ИСО 6887-2.
5.3 Цофалотин-фуцидин натрия-цетримидин агар (CFC агар){1]
5.3.1 Основа среды
5.3.1.1 Состав:
- желатин ферментативно гидролизованный................16.0 г. -
казеин ферментативно гидролизованный...................10,0 г: -
сульфат калия (K2SO4) ...................................................10.0 г, -
хлорид магния (MgCI2) ...................................................1.4 г;
-агар*..................................................................................от 12.0 до 18.0 г;
- дистиллированная вода................................................ 1000 см3.
5.3.1.2 Приготовление
Компоненты или сухую готовую среду растворяют в дистиллированной воде при нагревании.
При необходимости устанавливают pH среды (см. 6.4) так. чтобы после стерилизации его значе
ниесоставляло 7.2 i 0.2 при температуре 25 °С. Разливают основу питательной среды в колбы или фла
коны соответствующего объема (см. 6.6) и стерилизуют в автоклаве (см. 6.1) при температуре 121 вС в
течение 15 мин.
5.3.2Растворы селективных добавок
Растворы хранят при температуре (5
1
3) °С не более 7 сут.
5.3.2.1 Раствор цефалотина
5.3.2.1.1 Состав:
цефалотина натриевая соль.............................................0.1 г;
дистиллированная вода................................................... 100 см3.
5.3.2.1.2 Приготовление
Натриевую соль цефалотина растворяют в дистиллированной воде и стерилизуют раствор путем
фильтрования.
5.3.2.2 Раствор фуцидина натрия
5.3.2.2.1 Состав:
фуцидин натрия................................................
...
0.1 г;
дистиллированная вода...................................................100 см3.
5.3.2.2.2 Приготовление
Фуцидин натрия растворяют в дистиллированной воде и стерилизуют раствор путем фильтрова
ния.
5.3.2.3 Раствор цетримида
5.3.2.3.1 Состав:
цетримид**........................................................................0,1 г;
дистиллированная вода...................................................100 см3.
* Используемая масса зависитот прочности агарового геля.
** Смесьсостоит в основном изтетрадецилтриметиламыония бромида с небольшим количеством додецил-
триметиламмония бромида и цетримония (гексадецилтриметиламмония) бромида.
2