ГОСТ 31663— 2012
Приложение А
(обязательное)
Подготовка колонки и определение ее эффективности
А.1 Подготовка колонки при первоначальной организации работы на приборе
А.1.1 Заполнение колонки
А.1.1.1 Насадочную колонку заполняют насадкой, состоящей из носителя и неподвижной фазы. Неподвиж
ная фаза составляет от 5 % до 20 % массы насадки:
- носитель: диатомитовая земля, промытая кислотой и силанизированная или другой инертный носитель с
узким диапазоном величины частиц (вдиапазоне от 125до 200 мкм с интервалом 25 мкм). Величина частиц носите
ля должна соответствовать внутреннему диаметру идлине колонки;
- неподвижная фаза, полярная жидкость полиэфирного типа (лолидиэтиленгликольсукцинат. полибутанди-
олсукцинат. лолиэтиленгликольдипинат и др.). цианосиликоны или какая-либодругая жидкость, обеспечивающая
требуемое хроматографическое разделение.
А.1.1.2 Внутреннюю поверхность капиллярной колонки перед нанесением покрытия неподвижной фазой
обрабатываютдля инактивации. Толщина покрытия — от 0.1 до 0.2 мкм.
Неподвижная фаза типа лолигликоля (полиэтиленгликоль 20000), полиэфира (полибутандиолсукцинат) или
полярные лолисилоксаны (цианосиликоны).
А.1.2 Кондиционирование колонки
А.1.2.1 Насадочную колонку отсоединяют от детектора. Термостат нагревают до 185 *С и пропускают ток
инертного газа через свежеприготовленную колонку соскоростью от20до 60 см3/мик в течение 16ч и 2ч при темпе
ратуре 195“С.
А.1.2.2 Капиллярную колонку осторожно устанавливают в термостате. При сборке выполняют следующие
условия:
- колонкуустанавливают в термостате (с опорой).
- все соединения должны быть герметичны.
- концы колонки соединяют с инжектором идетектором с учетом сокращения мертвого обьема до минимума.
Через колонку пропускают поток газа-носителя.
Кондиционирование капиллярной колонки проводят в режиме программирования температуры термостата
со скоростью 3 °С/мин от температуры окружающего воздухадо температуры на 10 *С ниже температурногопреде
ла расщепления неподвижной фазы.
Колонку выдерживают при этой
температурев течение 1ч дестабилиза
ции нулевой линии. Затем температуру
термостата доводят до 180 ‘Сдля рабо
ты в изотермических условиях.
П р и м е ч а н и е — В промыш
ленности выпускаются соответствую
щиепредварительнокондиционирован
ные капиллярные колонки.
А.1.3 Определение количества
теоретических тарелок (эффектив
ности) и разрешающей способности
(см. рисунок А.1)
Проводят анализ смеси метилсте-
арата и метилолеата в метиловых эфи
рах жирных кислот масла известного
состава (подсолнечного масла или мас
ла-какао).
Условия проведения измерения
подбирают так. чтобы максимум пика
метилстеарата был зарегистрирован
через 15 мин после пика растворителя.
Пик метилолеата должен занимать 3/4
всей шкалы, количество теоретических
В«ОД
пробы
Рисунок А.1 — Хроматограмма для определения количества теорети
ческих тарелок колонки (эффективности) разрешающей способности
7