ГОСТ 31789—2012
7.1.3 Приготовление градуировочных растворов
Градуировочные растворы готовят из стандартных растворов. Для этого в мерные колбы вмести
мостью 100 см3 отмеривают по0.5; 1.0; 2.5; 5.0 и 10,0 см3каждого амина идоводят объем до метки 0.2М
раствором соляной кислоты. Получают градуировочные растворы с массовой концентрацией по 0.005.
0.010. 0.025, 0.050 и 0,100 мг/см3каждого амина.
7.1.4 Приготовление ацетатного буферного раствора
8.2 г ацетата натрия переносят в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 6 см3уксусной кислоты и
доводят до метки дистиллированной водой. Значение pH буферного раствора должно составлять 4.7
♦ 0.1. Регулируют pH 1М раствором гидроксида натрия или уксусной кислотой.
7.1.5 Приготовление раствора уксусной кислоты молярной концентрацией 0,02 моль/дм3
1.2 г уксусной кислоты помещают в мерную колбу на 1000 см3 идоводятобъем до меткидистилли
рованной водой.
7.1.6 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрацией 0,2 моль/дм3
7.3 г соляной кислоты помещают в мерную колбу на 1000 см3идоводят объем до метки дистилли
рованной водой.
7.1.7 Приготовление раствора 5-диметиламино-нафталинсульфонил-хлорида (дансилхло-
рида) концентрацией 5 мг/см3
50.0 мгдансилхлорида взвешивают с точностью до десятых долей, помещают в колбу вместимос
тью 20—25 см3и добавляют 10 см3ацетона.
7.1.8 Подготовка колонки с Amberlite CG-50
2.0 г ионообменной смолы Amberlite CG-50 заливают 50 см3ацетатного буферного раствора по
7.1.4 и выдерживают в течение 24 ч, после чего заполняют колонку идают стечь элюату таким образом,
чтобы над слоем сорбента оставалось не более 3 мм раствора, приливают 50 см3 раствора соляной
кис лоты молярной концентрацией 0,2 моль/дм3,дают стечь раствору, но недопускают высыхания
колонки и приливают 100 см3буферного раствора.
7.2 Проведение испытания
7.2.1 Выделение биогенных аминов из продукта
Навеску продукта массой 10 г помещают в колбу вместимостью 100 см3, добавляют внутренний
стандарт объемом 1см3и доводятдо метки 10%-ным раствором трихлоруксусной кислоты. Затем гомо
генизируют полученную суспензию в течение 1—2 мин со скоростью не менее 8000 об/мин. Полученную
смесь фильтруют через складчатый фильтр.
7.2.2 Очистка фильтрата на колонке с ионообменной смолой Amberlite CG-50
В колбу вместимостью 50 см3 приливают 4 см3фильтрата по 7.2.1,0.4 см3 раствора гидроокиси на
трия массовой концентрацией 20 % и 30 см3 ацетатного буферного раствора. pH раствора должен быть
4.7 10.1. Подготовленный таким образом раствор осторожно наносят на колонку по 7.1.8. Промывают
колонку 30 см3ацетатного буфера, после чего элюируют амины 0.2М раствором соляной кислоты объе
мом 20 см3.5 см3элюата помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 см3и выпаривают на ротор ном
испарителе досуха при температуре не выше 60 вС.
7.2.3 Получение ДНС-производных выделенных биогенных аминов
Ксухому остатку, полученному по 7.2.2. приливают 0.1 см3насыщенного раствора бикарбоната на
трия (pH 8.5—9) и 1см3 ацетонового раствора ДНС-хлорида с концентрацией 5 мг/см3. Колбу закрывают
крышкой, смесь осторожно перемешивают и выдерживают при температуре 55 вС в течение 1 ч в тем
ном месте, периодически помешивая. Затем охлаждают и экстрагируют ДНС-производные бутилмети-
ловым эфиром трижды по 5 см3, объединенный экстракт высушивают, пропуская через фильтр
с безводным сульфатом натрия, после чего выпаривают на роторном испарителе при температуре
не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см3ацетонитрила. Измерения выполняют немедленно,
при задержке измерений более чем на 10 мин после процедуры получения анализ повторяют заново.
7.2.4 Приготовление ДНС-производных исходных растворов
Для получения ДНС-производных исходных растворов биогенных аминов 1 см3каждого стандар
тного раствора по 7.1.2 выпаривают на роторном испарителедосуха при температуре не выше 60 °С. по
сле чего проводят процедуру дериватизации по 7.2.3.
7.2.5 Приготовление ДНС-производных градуировочных растворов
Для получения градуировочныхрастворовДНС-производныхбиогенных аминов 1см3каждогогра
дуировочного раствора по 7.1.3 выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре не выше 60
°С. после чего проводят процедуру дериватизации по 7.2.3.
4