ГОСТ Р 53886—2010
- 1см3исходной пробыи 99см3морской воды (кратность разбавления: 1%, в 100 раз):
- 0.1 см3 исходной пробы и99.9 см3морской воды (кратностьразбавления: 0.1%. в 1000раз).
Анализируемые пробы отработанных буровыхрастворов, твердых промышленных отходов и
донных отложений готовят из водных вытяжек (см. 4.3.4.3) путем их разбавления морской водой
(см. 4.2) аналогичноподготовке анализируемыхпроб сточной воды.
Анализируемую пробу раствора вещества готовят следующим способом: в пять конических колб
вместимостью 150 см3 вносят по 100 см3морской воды (см. 4.2). добавляют в колбы рассчитанные
объемы исходного раствора вещества (см. 4.3.4.4) для получения заданных концентраций (см. 4.4.1,
4.4.2).
4.3.4.7Измеряют ирегистрируют минерализацию (соленость). pH и концентрацию растворенно
го кислорода в каждой емкостисанализируемой пробой.
4.3.5 Подготовка тест-организмов к тестированию
Подготовку тест-организмов к тестированию проводят в соответствии с требованиями
приложенияВ с учетом требований 4.3.4.
4.4 Проведение тестирования
Тестирование проводят вдва этапа: предварительное иокончательное.
4.4.1 Предварительное тестирование
Предварительное тестирование проводят для установления диапазона разбавлений (кон
центраций) проб, в пределах которого необходимо провести окончательное тестирование для
определения значения 72ч ЛКР00(96 ч ЛКР50) или 72 ч ЛК10взависимости от анализируемыхпроб.
Припрвдеарителыюмтестированииисследуют широкуюобластьразбавлений (неменеепяти)
сточных вод. водныхвытяжекиконцентрации растворов вещества, выбираемых в геометрической про
грессии. при этом, как правило, используют коэффициент 10 междуразбавлениями (концентрациями).
Припредварительном тестировании применяют неменее двух чашекПетрина каждое анали
зируемоеразбавление (концентрацию; пробы ииспользуют не менее 40 тест-организмов.
Предварительное тестирование проводят по 4.4.3.
Пример проведения предварительного тестирования и установления диапазона концентра
цийвещества, в пределахкоторогонеобходимопроводитьокончательное тестирование, приведен
вприложенииА.
4.4.2 Окончательное тестирование
Порезультатам предварительного тестирования(см. 4.4.1) выбираютдиапазонразбавлений (кон
центраций) анализируемых проб для окончательного тестирования. При этом используют коэффици
ент между разбавлениями (концентрациями), как правило. 2.0 или 2.5.
Окончательное тестирование проводят по 4.4.3. При этом используют не менее пяти разбавле
ний (концентраций) анализируемых проб, применяют не менее трех чашек Петри для каждого раз
бавления(концентрации) ине менее 60тест-организмов.
Пример проведения окончательного тестирования и установлениязначений средней леталь
нойконцентрации 72ч ЛКw для веществаприведен в приложении А.
4.4.3 Процедура тестирования
4.4.3.1 Для каждой серии разбавлений (концентраций) анализируемых проб используют
контрольную пробу, содержащую объем морскойводы (см. 4.2 или 4.3.2), равныйобъемуанализируемо
го раствораодного из разбавлений (одной из концентраций) пробы.
Контрольная проба, а также вода для замачиванияяиц Artemia salina L. должны соответствовать
минерализации (солености) анализируемой пробы.
4.4.3.2 Передначалом тестирования вемкостивместимостью 200см3вносят по 150 см3анали
зируемойпробы заданногоразбавления (концентрации) (см. 4.3.4.6)иизмеряютконцентрацию раство
ренного кислорода и pH. Измеряемые характеристики должны соответствовать указанным в 4.3.4.5.
Аналогичную процедурупроводят для контрольной пробы (см. 4.4.3.1).
П р и м е ч а н и е — Объем (ISO
c
m
j)
каждого разбавления (кониентрации) пробы достаточен для розлива
в три чашки Петри по 40
см
при
проведении
тестирования.
4.4.3.3 В каждую чашку Петри (см. 4.4.1 и 4.4.2) вместимостью 50 см1 вносят 40 см3анализируе
мой пробы (см. 4.3.4.6). соответствующейтребованиям 4.4.3.2. затем помещают по 20 экземпляров
тест-организмов. Тест-организмы рекомендуется переносить пипеткой с достаточно широким внут
ренним диаметром (пипеткой Пастера), чтобы не повредить их. Аналогичную процедуру проводят идля
контрольных проб (см. 4.4.3.1). Посадку тест-организмов начинают с контрольных проб. При этом
плотность посадки не должна превышать 1тест-организмна 2.0 см3раствора.
9