ГОСТ 31653—2012
8.6.5 Отмывка
Раствор из ячеек планшета, оставленный для инкубации в холодильной камере на 16 ч. сливают
вытряхиванием. Дозатором отмеряют по 0.25 см3раствора ОТ. вливают во все ячейки, оставляют на 2
мин и сливают вытряхиванием. Процедуру повторяютеще три раза.
8.7 Экстракция
Пробы массой 10 гпомещают в конические колбы вместимостью 100 см3. Цилиндром отмеряют и
добавляют к навескам грубых кормов (сено, солома) по 100 см3смеси ацетонитрила и воды по 8.4.2, к
пробам всех остальных кормов — по50 см3этой смеси. Колбы закрывают пробками, интенсивно встря
хивают 3 или 4 раза круговыми движениями, не допуская разбрызгивания и попадания содержимого на
горлышко и пробку, и оставляют на 16 ч при температуре от 18 °С до 22 °С. Затем содержимое колб с
навесками проб интенсивно встряхивают 3 или 4 раза и фильтруют в другие колбы через бумажный
фильтр, помещенный на воронку.
После окончания фильтрования колбы закрывают и наносятмаркировки, соответствующие номе
рам проб. Полученные фильтраты именуютсядалее экстрактами.
9 Определение микотоксинов
9.1 Приготовление рабочего раствора реактива БУФЕР-Р2
Дозатором отмеряют9.0см3воды, переливаютвпробирку, добавляют 1,0 см3реактива БУФЕР-Р2,
перемешивают, наносятмаркировку Р2.
9.2 Приготовление рабочих растворов экстрактов
Дозатором отмеряют по 0,27 см3раствора Р2 и вливают их в пробирки. Дозатором отмеряют по
0.03 см3экстрактов, вливаютв пробирки, перемешивают инаносятмаркировки, соответствующие номе
рам проб. Кратность разбавления экстрактов равна 10. При необходимости может быть использована
кратность разбавления экстрактов более 10.
9.3 Приготовление рабочего раствора КО
Рабочий раствор КО используют для дальнейшего разбавления рабочих растворов экстрактов и
для приготовления рабочих растворов микотоксинов.
Дозатором отмеряют 1.35 см3раствора Р2 и вливаютего в пробирку. Дозатором отмеряют0,15 см3
смеси ацетонитрила и воды (см. 8.4.2). Раствор перемешивают инаносят маркировку КО.
9.4 Приготовление рабочих растворов микотоксинов
9.4.1 Общие положения
Объемы рабочих растворов не изменяют в зависимости от числа полосок планшета, взятых в
работу.
9.4.2 Приготовление рабочих растворов афлатоксина В,, роридина А, стеригматоцистина,
Т-2 токсина, зеараленона и охратоксина А
Дозатором водну пробиркуотмеряют0.27 см3 раствора Р2 и в две пробирки — по0,24 см3раство
ра КО.Шприцемвместимостью 0.1 см3отмеряютО.ОЗ см3вспомогательногорастворамикотоксина ивли
вают в первую пробирку, раствор перемешивают инаносят маркировку К1.
Дозатором отмеряют0.06см3раствора К1. вливают во вторую пробирку, растворперемешивают и
наносят маркировку К2.
Дозатором отмеряют 0,06 см3раствора К2, вливают в третью пробирку, перемешивают и наносят
маркировку КЗ.
9.4.3 Приготовление рабочих растворов фумонизина В,
Дозатором водну пробиркуотмеряют 0,27 см3 раствора Р2 и в две пробирки — по0,27 см3раство
ра КО.Шприцемвместимостью0,1см3отмеряют0.03см3вспомогательногорастворамикотоксина ивли
вают в первую пробирку, раствор перемешивают инаносят маркировку К1.
Дозатором отмеряют0.03см3раствора К1. вливаютво вторую пробирку, раствор перемешивают и
наносят маркировку К2.
Дозатором отмеряют 0.03 см3раствора К2. вливают в третью пробирку, перемешивают и наносят
маркировку КЗ.
Концентрации рабочих растворов микотоксинов, приготовляемых по 9.4. и соответствующие им
значениядесятичных логарифмов приведены в таблице2.
7