ГОСТ Р 53955—2010
10Проведение определения
10.1 Проба для анализа — приготовление испытуемого раствора
10.1.1 Взвешиваютс точностьюдо 0.001 г около 0.400 г пробы продукта в стеклянном лаборатор
ном стаканепоГОСТ25336ирастворяютв 2см3петролейногоэфира(5.2). Добавляют20мкл внутренне
гостандартного раствора (5.10) при помощи микрошприца. Это эквивалентно 50 мкг/кгприпересчете на
массу пробы. Если ожидается высокий уровень бенз(а)пирена. добавляют 50 мкл внутреннего стан
дартного раствора (5.10). Это эквивалентно 125 мкг/кг при пересчете намассу пробы.
10.1.2 Хроматографическую колонку (7.1) заполняют на половину ее высоты петролейным эфи
ром (5.2). Незамедлительно взвешивают 22 г оксида алюминия (5.8) в химическом стакане по
ГОСТ 25336 вместимостью 50 см3и тут же переносят в колонку, после чего осторожно встряхивают
колонкудля усиления эффекта седиментацииоксида алюминия.
10.1.3 Добавляютбезводный сульфатнатрия (5.7) к верхнейчасти колонкидля образования слоя
толщиной 30 мм.
10.1.4 Открываюткран идаютпетролейномуэфирустечьдоуровняверхаслоясульфатанатрия.
10.1.5 Под колонкой помещают мерную колбу на 20 см3.
10.1.6 Вводят раствор масла (10.1.1) в колонку. Промывают колонку минимальным количеством
петролейногоэфира (5.2). давая слою растворителя пройти сквозьслойсульфата натрия в периодмеж
ду промывками.
10.1.7 Элюируют колонку с использованием петролейного эфира со скоростью потока приблизи
тельно 1мл/мин, удаляя порвые 20 см3элюата исобирая последующие 60 см* элюата в круглодонную
колбу объемом 100 см3.
10.1.8 Выпаривают растворительиз элюата на водяной бане, установленной на 65 °С, до объема
приблизительноот0.5 см3до 1.0 см3ипереносят концентрированный раствор в пузырек малогообъема
ссуженным верхом (7.7), предварительно взвешенный сточностью 0.1 мг.
10.1.9 Продолжаютвыпаривание изпузырька на водянойбане (5.1), установленнойнатемперату
ру 35 °С. вслабом токеазота (около25 см3/мин)до практически сухого состояния. Споласкиваюткругло
донную колбу 1см3петролейного эфира и количественно переносят промывочный раствор в
пузырек, продолжая выпаривание ватмосфереазота. Процедуруополаскиванияповторяютсо
свежейпорцией петролейногоэфира и количественнопереносятпромывочный раствор в пузырек.
П р и м е ч а н и е — В 10.1.9 приводится уточнение процедуры выпаривания в цепях более точного сбора
элюата.
10.1.10 Продолжают выпаривание при температуре 35 °С в токе азотадо сухого остатка.
10.1.11 Пузырек взвешивают с точностью до 0,1 мг и рассчитывают массу остатка. Укупоривают
пузырекпрокладкой из ПТФЭ иалюминиевой крышкой и хранят при температуре4 5С.
10.2 Высокоразрешающая жидкостная хроматография
10.2.1 Используютсмесьиз880см3ацетонитрила (5.3) и 120см3воды (5.1) вкачестверастворите
ля для элюирования. Дегазируют растворитель для элюирования с целью устранения кислорода во
избежание гашения флюоресценции. Используют продувку гелием или подключенную установку ваку
умнойдегазации.
10.2.2 Элюируютсо скоростью потокаоколо 1мл/мин.
10.2.3 Калибровочная кривая и определение относительного коэффициента чувствитель
ности детектора
Готовят5 разбавлений стандартного раствора бенз(а)пирена (5.9.2), такихчтобы инжекция 50 мкл
каждогоизнихдавала результаты, соответствующие 0,01 нг:0.04 нг; 0,2нг; 1,0 нги2.0 нгбенз[а]пирена. К
стандартным растворам добавляют 0,5 нг внутреннего стандартного раствора. На основе данных рас
творов строят калибровочную кривую из пяти точек, используя площади пиков, полученные интеграто
ром ирегистрирующим устройством. Данную калибровкутакже используютдля расчетаотносительного
коэффициента чувствительности детектора (10.1) между бенз[а]пиреном и внутренним стандартным
раствором.
10.3 Анализ проб
10.3.1Инжектируют 250 мкл смеси ацетонитрил-тетрагидрофуран (5.5) в пузырек, содержащий
очищенный остаток (10.1.11). Растворяют остаток путем осторожных круговых движений, избегая кон такта
растворителя с прокладкой.
4