ГОСТ Р 53152—2008
Каждую новую партию сорбента перед использованием необходимо проверить на качество деле
ния. Для этого через колонку с подготовленным сорбентом пропускают 1см3градуировочного раствора
No 2 или No 3 с добавлением очищенного экстракта рабочей пробы по 7.2, проводят процедуру очистки
по7.2.2, послечегоанализируютс помощьювысокоэффективнойжидкостнойхроматографии. Всеинди
видуальные ПАУ(особеннонаиболеелегкие инаиболее тяжелые), входящие всостав градуировочного
раствора, не должны быть потеряны или перекрываться пиками мешающих их определению веществ.
При неудовлетворительных результатах либо меняют партию сорбента, либо подбирают условия
очистки, варьируя объем отбрасываемой фракции иэлюата.
7.1.6.2 Заполнение хроматографической колонкисефадексом LH-20
(4,0 i 0,1) г сефадекса марки LH-20 взвешивают нааналитических весах и заливают 50 см3этило
вого спирта, выдерживают для набухания не менее 3 ч. после чего осторожно переносят в колонку.
Колонку необходимо заполнять одномоментно во избежание неравномерного заполнения колонки.
Дают стечьспиртудо высоты 1—2 мм надверхним слоем сорбента, послечего вносятэкстракт.
Заполненную колонкудопускается хранить и использовать повторно. Для повторного использова
ния необходимо промытьколонку50 млэтилового спирта. Дляхранения необходимо заполнитьколонку
этиловым спиртом, закупорить колонку пробкой и не допускать высыхания сорбента. В случае
высыха ния сефадекса рекомендуется приготовить новую колонку.
7.1.6.3 Приготовление раствора гидроокиси калия в этиловом спирте
В колбувместимостью 150—200см3помещают (8.0 ± 0.1)г гидроксидакалия, добавляют2см3дис
тиллированной воды и98 см3этилового спирта, перемешиваютдо полного растворения.
7.2 Проведение испытаний
7.2.1 Выделение ПАУ из продукта
Навеску продукта массой 10.0—20.0 г, взвешенную с точностью до 0,01 г, помещают в плоскодон
ную колбу вместимостью 250 см3,добавляют 50 см3спиртового раствора гидроокиси калия. Содержи
моеколбы перемешиваютвстряхиванием. Затем впробупродуктаипробуконтрольногоопытавносят по
10 мкл внутреннегостандарта — рабочего раствора бенз(Ь)хризена. приготовленногопо7.1.2массовой
концентрацией5 мкг/см3. Колбусоединяютс обратным холодильником инагреваютна водянойбанепри
температуре85 вС—90 °Свтечение Зч. Затем в колбучерезхолодильникдобавляют 100 см3дистилли
рованной воды. Реакционнуюсмесьохлаждаютдо комнатнойтемпературы ипослеохлажденияперено
сят в делительную воронкувместимостью 250 см3. Вслучаеесли после гидролиза в реакционной массе
остался нерастворимыйосадок, его отделяютнаворонке Бюхнера, промывая нафильтре 30см3горяче
гоэтилового спирта. Спирт послепромывкидобавляют вделительную воронкусреакционнойсмесью. В
делительную воронку также добавляют 30 см3 н-гексана. Содержимое воронки встряхивают в течение 2
мин и оставляют для расслаивания. В случае образования эмульсии к смеси в делительной воронке
добавляют10—20см3этилового спирта. Послерасслаиваниянижнюю водно-спиртовуюфазусливаютв
колбу, аверхнийгексановыйслой переливаютвдругуюделительную воронку. Затем повторяютэкстрак
цию ПАУизводно-спиртовой фракциин-гексаном ещедва разапо30см3.Гексановыеэкстрактыобъеди
няют в делительной воронке и промывают дистиллированной водой трижды по 30 см3, после чего
экстракт фильтруют через слой безводного сульфата натрия в грушевидную колбу вместимостью
100 см3. Раствор выпаривают на ротационном испарителедо объема 50 см3при температуре водяной
бани не выше 50 °С.
Упаренный экстракт переносят вделительную воронку вместимостью 250 см3 идобавляют к нему
50 см3смесидиметилформамида с водой в соотношении 9:1. Интенсивно встряхиваютсмесь в течение
1мин. послерасслаиванияфаз нижнююсливаютв плоскодонную колбу, а верхний гексановыйслой сно
ва подвергают экстракции, добавляя 50 см3 смесидиметилформамида иводы. Гексановый слой отбра
сывают. объединенный диметилформамидный экстракт переносят в делительную воронку
вместимостью 500см3,добавляют 100 см3дистиллированнойводы, встряхиваютипроводятэкстракцию
из воднойфазы н-гексаном трижды по50 см3.Водную фазуотбрасывают, агексановый экстракт промы
вают водой три раза по 30 см3, переносят в плоскодонную колбу, добавляют 10 г безводного сульфата
натрия ивыдерживают втечение 1ч, послечего фильтруют вкруглодонную колбу. н-Гексан выпаривают
наротационном испарителедообъема 1,0см3и остатокочищаютна колонкесдезактивированным сили
кагелем (см. 7.2.2) или осторожно упаривают досуха потоком воздуха через вакуумный аллонж, соеди
ненный с водоструйным насосом, остаток в колбе растворяют в 0.5 см3этилового спирта и очищают на
колонке с сефадексом (см. 7.2.3).
5