ГОСТ Р 53149—2008
7.1.4 Приготовление ацетатного буферного раствора
8.2 г ацетата натрия переносят в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 6 см3уксусной кислоты и
доводят до метки дистиллированной водой. Значение pH буферного раствора должно составлять 4.7
♦0.1. Регулируют pH 1М раствором гидроксида натрия или уксусной кислотой.
7.1.5 Приготовление раствора уксусной кислоты молярной концентрацией 0,02 моль/дм3
1.2 г уксусной кислоты помещают в мерную колбу на 1000 см3и доводят объем до метки дистилли
рованной водой.
7.1.6 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрацией 0.2 моль/дм3
7.3 г соляной кислоты помещают в мерную колбу на 1000 см3идоводятобъем до метки дистилли
рованной водой.
7.1.7 Приготовление раствора 5-диметиламино-нафталинсульфонил-хлорида (дансилхло-
рида) концентрацией 5 мг/см3
50.0 мгдансилхлорида взвешивают с точностью до десятых долей, помещают в колбу вместимос
тью 20—25 см3и добавляют 10 см3ацетона.
7.1.8 Подготовка колонки с Amborlite CG-50
2.0 г ионообменной смолы Amberlite CG-50 заливают 50 см3 ацетатного буферного раствора
по 7.1.4 и выдерживают в течение 24 ч. после чего заполняют колонку и дают стечь элюатутаким обра
зом. чтобы над слоем сорбента оставалось не более 3 мм раствора, приливают 50 см3раствора соля
ной кислоты молярной концентрацией 0.2 моль/дм3, дают стечь раствору, но не допускают высыхания
колонки и приливают 100 см3 буферного раствора.
7.2 Проведение испытания
7.2.1 Выделение биогенных аминов из продукта
Навеску продукта массой 10 г помещают в колбу вместимостью 100 см3, добавляют внутренний
стандарт объемом 1см3идоводятдо метки 10 %-ным раствором трихлоруксусной кислоты. Затем гомо
генизируют полученную суспензию в течение 1—2 мин со скоростью не менее 8000 об/мин. Полученную
смесь фильтруют через складчатый фильтр.
7.2.2 Очистка фильтрата на колонке с ионообменной смолой Amberlite CG-50
В колбу вместимостью 50 см3приливают 4 см3 фильтрата по 7.2.1.0.4 см3раствора гидроокиси на
трия массовой концентрацией 20 % и 30 см3 ацетатного буферного раствора. pH раствора должен быть
4.7 ♦0,1. Подготовленный таким образом раствор осторожно наносят на колонку по 7.1.8. Промывают
колонку 30 см3ацетатного буфера, после чего элюируют амины 0.2М раствором соляной кислоты объе
мом 20 см3. 5 см3элюата помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 см3ивыпаривают на ротор
ном испарителе досуха при температуре не выше 60 °С.
7.2.3 Получение ДНС-производных выделенных биогенных аминов
К сухому остатку, полученному по 7.2.2. приливают 0.1 см3 насыщенного раствора бикарбоната на
трия (pH 8,5—9) и 1см3ацетонового раствора ДНС-хлорида с концентрацией 5 мг/см3. Колбу закрывают
крышкой, смесь осторожно перемешивают и выдерживают при температуре 55 °С в течение 1ч в тем
ном месте, периодически помешивая. Затем охлаждают и экстрагируют ДНС-производные бутилмети-
ловым эфиром трижды по 5 см3, объединенный экстракт высушивают, пропуская через фильтр
с безводным сульфатом натрия, после чего выпаривают на роторном испарителе при температуре
не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см3ацетонитрила. Измерения выполняют немедленно,
при задержке измерений более чем на 10 мин после процедуры получения анализ повторяют заново.
7.2.4 Приготовление ДНС-лроизводных исходных растворов
Для получения ДНС-производных исходных растворов биогенных аминов 1см3 каждого стандар
тного раствора по 7.1.2 выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре не выше 60 °С,
после чего проводят процедуру дериватизации по 7.2.3.
7.2.5 Приготовление ДНС-лроизводных градуировочных растворов
Для получения градуировочных растворов ДНС-производных биогенныхаминов 1см3каждогогра
дуировочного раствора по 7.1.3 выпаривают на роторном испарителедосуха при температуре не выше 60
°С. после чего проводят процедуру дериватизации по 7.2.3.
7.2.6 Опродоленио содержания биогенных аминов
7.2.6.1 Условия хроматографирования
Условия проведения хроматографического анализа подбираются в зависимости от вида применя
емого жидкостного хроматографа и хроматографической колонки.
Примерные условия хроматографического определения биогенных аминов:
4