ГОСТ Р 53093—2008
7 Проведение испытаний
7.1 Экстракция зеараленона из пробы
Навеску измельченного продукта (см. раздел 5) массой 5 г помещаютв плоскодонную колбу вмес
тимостью 100 см3.Добавляют2 см3дистиллированной воды итщательносмачивают пробу, интенсивно
встряхивая колбу вручную. При необходимости, стеклянной палочкой разбивают сухие комки и зоны на
дне колбы.
Добавляют 40 см3хлороформа по 6.7 и перемешивают 30 мин на аппарате для перемешивания.
Пропускают полученный экстракт через бумажный складчатый фильтр «красная лента». Отбирают 20
см3фильтрата. Если в анализируемой пробесодержание зеараленона ожидается не менее 1,5мг/кг,
отбирают 5 см3фильтрата.
7.2 Очистка экстракта
Отобранный согласно 7.1 фильтрат переносят в делительную воронку, добавляют к нему 40 см3
раствора гидроксида натриямассовой концентрации40 мг/дм3(см. 6.2.2)и встряхивают втечение2 мин.
Отбрасывают нижний хлороформный слой, отмеряют при помощи мерного цилиндра 30 см3верхнего
слоя, содержащегозеараленон, идобавляюткнему30см3растворортофосфорнойкислоты (см. 6.2.3).
При образованиив пробестойкойэмульсиипри экстракциирекомендуетсяупаривание начального
фильтрата (20 см3)до меньшего объема (5 см3)передэкстракцией или центрифугированиесмеси после
экстракции втечение 1мин при частоте вращения от3000до 4000 мин-1.
Нейтрализованный раствор переносят вделительную воронку и проводятэкстракцию зеаралено
нав хлороформдва раза порциями по20 см3в течение 1минкаждая. Собираютхлороформныеэкстрак
ты в колбу для упаривания, пропуская их через фильтр «красная лента», заполненный 5
г осушителя — безводногосернокислого натрия, предварительно промытого 5 см3хлороформа.
После пропускания экстрактов безводный сернокислый натрий на фильтре промывают 5 см3хло
роформа, присоединяя его к профильтрованному экстракту.
Выпаривают раствор досуха в токе азота или при разрежении от 2.5 до 10 кПа при температуре
водяной бани от 40 °С до 45 °С. К сухомуостаткудобавляют0,25 см3ацетонитрила, тщательно переме
шивают, азатемдобавляют0,25см3дистиллированной воды, выдерживают не менее 15мин иполучен
ный концентрат пробы используютдля хроматографического анализа по7.3 в течение рабочегодня.
7.3 Проведение хроматографических измерений
Регистрируют не менеедвух хроматограмм концентрата пробы, полученного по 7.2. Идентифици
руют пикзеараленона по совпадению времени удерживания зеараленона в концентрате пробы со вре
менем удерживания, полученном при контроле стабильности градуировочной характеристики.
Если зеараленон в концентрате пробы обнаружен, то вычисляют его массовую концентрацию для
каждойхроматограммы, используя градуировочную характеристику по6.5.
Проверяют выполнение условия (4). Если условие (4) выполняется, то в качестве значения массо
вой концентрации зеараленона в концентрате пробы принимают среднеарифметическое полученных
значений. Если условие не выполняется, проводят повторную регистрацию хроматограмм после устра
нения причины нестабильности.
Если массовая концентрация зеараленона в конечном концентрате (CJ превышает 5 мкг/см3. то
концентрат необходимо разбавить подвижной фазой по6.2.1. Коэффициент разбавления Овычисляют
поформуле
О = JL<9)
V.
где Vp— объем разбавленного концентрата пробы, см3:
— объем аликвотной порции исходного концентрата пробы, взятыйдля разбавления, см3.
При возникновении сомнений в правильности идентификации пика зеараленона рекомендуется
ввестидобавку раствора зеараленонав подвижнойфазе (см. 6.3.2) к концентрату пробы. О правильнос ти
идентификации судят по увеличению площади (высоты) предполагаемого пика зеараленона. Значе ние
добавки должно составлять от 50 % до 150 % от полученного значения массовой концентрации
зеараленона в концентрате пробы.
8 Обработка результатов испытаний
За результатизмерений массовойдоли зеараленонав пробе X. мг/кг, принимаютзначение, вычис
ленное по формуле
6