ГОСТ Р 52337—2005
Перед каждым внесением раствора экстракта анализируемой пробы в микроаквариум или лунку
наконечник пипетки следует вытирать ватой во избежание попадания вних жира с наружной стороны пи
петки.
Через 1 ч экспозиции при анализе водного раствора ацетонового экстракта исследуемого корма
или через 3 ч при анализе водного экстракта исследуемого корма вторично подсчитывают численность
стилонихий. В контрольных тестах все стилонихии должны оставаться живыми. Для того, чтобы за
вре мя экспозиции растворы в лунках не подсохли, под блок микроаквариумов или предметные стекла
под кладывают смоченную водой фильтровальную бумагу и накрывают их стеклянным колпаком.
Параллельно с биотестированием пробы корма, с целью определения качества ацетона и мине
рального раствора Лозина-Лозинского проводят контрольные тесты. Для этого в микроаквариумы или
лунки (в трех повторностях) помещают вышеуказанным способом стилонихии и заливают их:
а) 200 мкл 1%-ного раствора ацетона — 0.1 см1(100 мкл) ацетона на 10 см3раствора Лозииа-Ло-
зинского;
б) 200 мкл минерального раствора Лозина-Лозинского.
Качество ацетона проверяют каждый раз в начале использования новой партии реактива, а качес
тво раствора Лозина-Лозинского — при приготовлении новой порции.
В случае токсичности исследуемого корма стилонихии:
а) изменяют свою обычную вытянуто-овальную форму на округлую, а движение — на беспорядоч
ное с поворотом вокруг своей поперечной оси;
б) прекращаютдвижение и (или) подвергаются распаду — лизису (количество лизированных кле
ток зависит от степени токсичности кормов). Токсичность исследуемого корма определяют по выживае
мости стилонихий через 1 ч (при экстракции ацетоном) и 3 ч (при экстракции водой) экспозиции.
5.1.4 Обработка результатов
Выживаемость стилонихий N. %. вычисляют по формуле
N = N2: А/,100,(1)
где N2— среднеарифметическое (из пяти испытаний) значение количества стилонихий в конце опыта
через 1 ч экспозиции, шт.;
N, — среднеарифметическое (из пяти испытаний) значение количества стилонихий в начале опыта,
шт.;
100 — перевод результата в проценты.
Вычисления проводят сточностью до первого десятичного знака, а окончательный результат испы тания
регистрируют в протоколе с округлением до целого числа. Допускаемое расхождение между ре
зультатами двух параллельных определений при доверительной вероятности Р - 0.95 не должно
превышать 1 %.
Токсичность исследуемого корма определяют из расчета:
а) комбикорма для свиней:
80 % — 100 % выживаемости стилонихий — корм нетоксичный;
40 % — 79 % выживаемости стилонихий — корм слаботоксичный;
0 % — 39 % выживаемости стилонихий — корм токсичный.
б) комбикорма для других видов продуктивных и непродуктивных животных, птиц и рыб; фураж
ное зерно и продукты его переработки, концентрированные компоненты комбикормов:
70 % — 100 % выживаемости стилонихий — корм нетоксичный;
40 % — 69 % выживаемости стилонихий — корм слаботоксичный;
0 % — 39 % выживаемости стилонихий — корм токсичный.
5.1.5 Оформление результатов
Результаты испытаний заносят вжурнал иоформляют акт экспертизы или протокол испытаний, где
указывают наличие или отсутствие токсичности корма и возможность его использования.
Нетоксичным следует считать образец корма, определенный нетоксичным при параллельном
биотестировании как водного раствора ацетонового экстракта, так и водного раствора испытуемого
корма.
Нетоксичный корм дальнейшему исследованию не подлежит и используется по назначению без
ограничений.
Слаботоксичные и токсичные корма (хотя бы поодному из исследованных экстрактов) направляют
на биотестирование основными методами, а также на микологические, химико-токсикологические и бак
териологические исследования.
757